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中华人民共和国国家标准 生活饮用水标准检验方法微生物指标——4,5



录入时间:2008-12-15 17:16:41 来源:青岛海博生物

5.1.4.4镜检  打开显微镜和汞灯。预热10min后,在200倍的荧光显微镜下检查,在400倍的荧光显微镜下进一步证实。井将全井进行记数。  贾第鞭毛虫的袍囊是椭圆形的它们的长度为8um-14um,宽度为7um-10um。抱囊壁会发出苹果绿的荧光。在紫外光下,DAPI阳性抱囊会出现4个亮蓝色的核。隐抱子虫的卵囊为稍微椭圆的圆形。它们的直径为2um-6um。卵囊壁会发出苹果绿的荧光在紫外光下.DAPI阳性卵囊会出现4个亮蓝色的核计数整个井面,呈现表6特征的就是抱(卵)囊。
5.1.5结果的计算、报告和检测限5.1.5.1用式(5)报告每升样本中的抱(卵)囊数:Y一(X*V ) / ( V1*V2 · · · · · · · … (5 )式中:y每升水中抱囊或卵囊的数目;X― 计数样本的体积中抱囊或卵囊的数目;V― 离心后再悬浮的体积,单位为毫升(mL ) ;V1― 计数样本的体积,单位为毫升(mL ) ;V2― 过滤后水的体积,单位为升(L ) ;5.1.5.2用式6计算分析的检测限:D一V / ( V1*V2)· · · · (6 )式中:D一一每升抱囊或卵囊的检测限;V― 离心后再悬浮的体积,单位为毫升(mL ) ;V1― 计数样本的体积,单位为毫升(mL ) ;V2一过滤后水的体积,单位为升(I .)。5.1.6质量控制5.1.6.1免疫荧光质量控制免疫荧光试剂盒的控制必须每个星期做一次它由两个试验组成:一个阳性对照和一个阴性对照
5.1.6.2阴性对照5.1.6.2.1制准备一个井形载玻片。5.1.6.2.2加50uL蒸馏水,然后将它放在培养箱中干燥。5.1.6.2.3参照5.1.4.3染色5.1.6.2.4对整个井面进行计数。不得找出任何贾第鞭毛虫囊和隐抱子虫的卵囊。5.1.6.3阳性对照5.1.6.3.1制备一个井形载玻片5.1.6.3.2涡旋储存的原虫2min。5.1.6.3.3在同一井中搀加5uL贾第鞭毛虫囊和5uL隐抱子虫卵囊阳性样本,然后将它放在培养箱中干燥。5.1.6.3.4参照5.1.4.3染色。5.1.6.3.5对整个井面进行计数。必须找到根据表6中描述的规则而均匀染色的抱囊和卵囊5.1.6.4整个程序的质量控制整个步骤(从采样到质量控制显微镜检查)的质量控制应每三个月做一次。它由两个试验组成:分析ZoL加有原虫的水作为阳性对照,分析20L的蒸馏水作为阴性对照。5.1.6.4.1阴性对照A加201蒸馏水到小口塑料瓶中。B与样品分析一样分析蒸馏水。不得找到任何贾第鞭毛虫或隐抱子虫将所有结果记录在表7原虫测定方法质量控制表格中5.1.6.4.2阳性对照为了做阳性对照,应在20l蒸馏水中搀加已知数量的囊和卵囊。用血球计数器和用染色的井形载玻片.测定在201蒸馏水中加人的饱囊和卵囊的数量A原虫接种液的计数涡旋2min储存的原虫。b在一个有10ml蒸馏水的烧杯中加一些抱囊和卵囊,以便得到一个最终浓度大约每ml50000护个抱(卵)囊的溶液。用磁棒搅拌30min。d用血球计数器测定这种溶液的浓度10次e用染色的井形载玻片[加大约250个抱〔 卵)囊到井上」测定这种溶液的浓度5次。计数这两种方法的浓度和标准差。如果标准差小于25 %,那么就可以把这个读数看作是正确的。如果标准差大于25 %,就要制备新的原虫接种液,然后再测定它的浓度。B阳哇对照的分析在装有101,蒸馏水的小口塑料瓶中加500个贾第鞭毛虫的抱囊和500个隐抱子虫的卵囊。b用滤囊过滤该水用10L蒸馏水冲洗小口塑料瓶,然后用同一个滤囊过滤该水。d分析这个样品要象分析一个典型的样品一样将所有结果记录在表7中。这种方法的回收率为10%一100%之间如不在此范围,需检查所有的设备和试剂,同时再做一个阳性对照5.1.6.5免疫灸光质,控制记录原虫测定方法质量控制记录到表7中   
   

 

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