中华人民共和国国家标准游泳池水微生物检验方法细菌总数测定GB/T18204．9一2000
Methods of mlcrobioIOgical examination for watet in swimming pool——Determlnatlon of aerobic bacterialcount
1、范围
本标准规定了游泳他水细菌总数的检验方法。本标准适用于游泳池水细菌总数的测定。
2、引用标准
下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时，所示版本均为有效。所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性．
GB/T18204.1一2000公共场所空气微生物检验方法细菌总数测定GB/T18204.2一2000公共场所茶具微生物检验方法细菌总数测定
3、定义
本标准采用下列定义。 细菌总数aerobic Lacterial count：指水样在一定的条件下培养后（如培养基成分和pH、培养的温度和时间以及需氧性质等）l ml检样中所含菌落的总数。本方法规定的培养条件下所得结果，只包括一群在营养琼脂上生长发育的嗜中温性需氧菌落总数。
4、仪器
4.1三角瓶。
4.2量筒。
4.3 pH计或精密pH试纸．
4.4高压消毒锅．
4.5试管。
4.6灭菌平皿：直径9 cm .
4.7灭菌刻度吸管：10mL、2mL、1mL .
4.8酒精灯。
4.9恒沮培养箱。
4.10放大镜。
5、培养基和试剂
5.1营养琼脂培养基见GB/T18204.1一2000中第4章。
5.2 10 %（m/m）硫代硫酸钠溶液，121℃ 高压灭菌20min .
6、操作步骤
6.1采样瓶的要求和预处理：用于微生物分析的采样瓶要无酸、无碱、无毒的玻璃容器。采样瓶在灭苗前加人足量的10%（m/m）硫代硫酸钠溶液。一般情况下125mL的采样瓶加0.1ml，加完后121℃高压灭菌20min。
6.2用灭菌吸管吸取均匀水样1mL，注人到灭菌平皿内，另取1mL注人另一灭菌平皿内作平行接种．取lmL加到9mL无菌生理盐水中作1 : 10稀释，混匀后取ZmL分别加到两个无菌平皿内，每皿1mL。
6.3将溶化并冷却至45℃的营养琼脂培养基倾注平皿内，每皿约15mL，另取一个不加样品的平皿作空白对照。立即旋摇平皿，使水样和培养基充分混匀。待琼脂凝固后翻转平皿．置36℃士1℃恒温箱内培养48h。
7、菌落计数方法 先用肉眼观察，点数菌落数，然后再用放大5——10倍的放大镜检查，以防遗漏．记下各平皿的菌落数后．求出同一稀释度各平皿生长的平均菌落数。若平皿中有连成片状的菌落或花点样苗落蔓延生长时，该平皿不宜计数。若片状菌落不到平皿的一半，而其余一半中茵落分布又很均匀时．则可将此半个平皿菌落计数后乘以2，所得结果代表全皿菌落数。
8、菌落数报告方式 见GB/T18204.2一2000中的第9章。
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