出口食品中金黄色葡萄球菌检验方法——3

附　录 A 　　　　　　　　　　　　　　
培 养 基 和 试 剂 (补充件)
A1　普通肉汤培养基 　　
成分： 　
牛肉膏　　　　　　　　　　　　　 5.0g 　
氯化钠　　　　　　　　　　　　　 5.0g 　
蛋白胨                           20.0g 
蒸馏水                           1000.0mL 　　
制法：将以上成分混合加热溶化,调至pH7.4～7.6,分装试管,121℃高压灭菌30min。
A2　胰蛋白胨大豆肉汤 　　
成分： 　
胰蛋白胨                            17.0g 　
植物蛋白胨　　　　　　　　　　　　　3.0g 　
氯化钠　　　　　　　　　　　　　　　5.0g 　
磷酸氢二钾(K2HPO4)                  2.5g 　
葡萄糖　　　　　　　　　　　　　　　2.5g　
蒸馏水                              1000.0mL 　　
制法：将各成分溶于蒸馏水中,必要时加热使完全溶解,分装于试管或玻瓶中,121℃ 高压灭菌15min,最终pH7.3±0.2。　　
注：制备双料胰蛋白胨大豆肉汤时,除蒸馏水外,其他成分加倍,配制10％或20％氯化钠胰蛋白胨大豆肉汤时,可将氯化钠量增加至所需浓度。 
A3　Baird-Parker培养基 　　
成分： 　
胰蛋白胨                              10.0g 　
牛肉膏　　　　　　　　　　　　　　　　5.0g 　
酵母膏　　　　　　　　　　　　　　　　1.0g 　
丙酮酸钠                              10.0g 　
甘氨酸                                12.0g 　
氯化锂(LiCl·6H2O)　　　　　　　　　  5.0g 　
琼脂                                  20.0g 　
蒸馏水                                950.0mL 　　
制法：将各成分加于蒸馏水中,加热煮沸使完全溶解,冷至25℃,调至pH7.0±0.2,分装每瓶95mL,121℃高压灭菌15 min,临用时加热溶化琼脂,冷至50℃左右,于每95mL加入预热至50℃的卵黄亚碲酸钾增菌剂5mL,摇匀后倾注平皿培养基,应是致密不透明的,使用前在冰箱贮存不得超过48 h。 　　
卵黄亚碲酸盐增菌剂配制： 　　
将新鲜鸡蛋浸泡在适当的HgCl2溶液(1:1000)中约1 min,以无菌操作打开鸡蛋,使蛋黄与蛋白分开,将蛋黄加于生理盐水中(3＋7,V/V)充分摇匀,于50mL蛋黄乳液中加入10mL过滤除菌的1％亚碲酸钾水溶液,混匀,4±1℃贮存。 
A4　甲苯胺蓝-DNA琼脂 　　
成分： 　
脱氧核糖核酸(DNA) 　　　　　　  0.3g 　
琼脂                            10.0g 　
氯化钙(CaCl2无水)　　　　　　　 1.1g
氯化钠                          10.0g 　
甲苯胺蓝(O) 　　　　　　　　　  0.083g
三羟甲基氨基甲烷　　　　　　    6.1g 　
蒸馏水                          1000.0mL　　
制法：将三羟甲基氨基甲烷溶解于蒸馏水中,调至pH9.0,除甲苯胺蓝(O)外将其余各项成分加热使溶解。再将甲苯胺蓝(O)溶于培养基中。分装于塞有橡皮塞的烧瓶中。如立即使用可不需灭菌。已灭菌的培养基在室温可存放4个月无变化,并经数次熔化后仍可使用。 
A5　生理盐水 　　成分：　　　　　　　　　　　　　　　　 
氯化钠　　　　　　　　　　　　　 8.5g 　
蒸馏水                           1000.0mL 　　
制法：将氯化钠溶于蒸馏水中,分装于适当容器中,121℃高压灭菌15 min。
A6　凝固酶试验兔血浆　　
临用时取3.8％(取柠檬酸钠3.8 g加蒸馏水100 mL,待溶解后过滤,121℃高压灭菌15min)柠檬酸钠1份,加入新鲜兔血4份,混匀后放冰箱中使用球沉降(或以3000r/min离心30min)后取上清液进行试验。 　　　　　   
   

 

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