出口畜产品中炭疽杆菌检验方法——3

7 结果的判定和报告
7.1 结果的判定在菌落形态、细菌形态和肉汤生长特性三项中有一项不符合炭疽杆菌特征时,判为非炭疽杆菌。在其余五项试验(确定试验)中有两项或更多项不符合炭疽杆菌特征时,判为非炭疽杆菌；全部符合或仅有一项不符合炭疽杆菌特征时,判为有炭疽杆菌。7.2 结果的报告
7.2.1 凡结果判为非炭疽杆菌的检验样品,报告该样品所代表的同批产品“经检验未发现炭疽杆菌”。
7.2.2 凡结果判为有炭疽杆菌的检验样品,报告该样品所代表的同批产品“经检验发现炭疽杆菌”。
附 录 A培养基和试剂(补充件)
A1 溶菌酶多粘菌素琼脂(Knisely)
营养琼脂(见A4) 1 000mL
多粘菌素 3 000IU
溶菌酶 4 mg/mL 
溶液 10 mL
乙酸亚铊 4 mg/mL 溶液 10 mL
EDTA 20 mg/mL 溶液 10 mL
除营养琼脂外,将其他成分用灭菌蒸馏水配成适当贮备液,按以上量加于冷至 50～55℃ 的灭菌营养琼脂内,充分摇匀,倾注平板。
A2 戊烷脒多粘菌素琼脂
A2.1 基础培养基
牛肉膏 3.0g
蛋白胨 20.0g 
氯化钠 5.0g
琼脂 20.0g
蒸馏水 1 000.0mL
将各成分加于蒸馏水中,煮沸至完全溶解,调整pH至7.4,过滤,分装于三角烧瓶中,每瓶400mL,121℃高压灭菌 20min。临时用加热融化,放于 45～50℃恒温水浴内保温。
A2.2 戊烷脒稀释液称取戊烷脒 0.1g,溶于 4mL灭菌蒸馏水内。贮存在 0～4℃ 冰箱,备用。
A2.3 多粘菌素稀释液取多粘菌素 B一瓶,加灭菌蒸馏水使其溶解,再用灭菌蒸馏水将其稀释为3000IU/mL。贮存于0～4℃冰箱,备用。
A2.4 脱纤维羊血以无菌操作采羊血 50～10 mL ,注入含玻璃小珠的灭菌三角烧瓶中,立即转摇数分钟。贮存于 0～4℃冰箱,备用。
A2.5 完全培养基基础培养基(45～50℃) 400.0 mL戊烷脒稀释液 0.4 mL多粘菌素稀释液 0.4 mL脱纤维羊血 8.0 mL以无菌操作将后三种成分加入基础培养基内,充分摇匀,倾注于灭菌皿内,每皿15mL左右。
A3 营养肉汤．
牛肉膏 3.0g
蛋白胨 20.0g
氯化钠 5.0g
蒸馏水 1000.0mL
将各成分溶于蒸溜水中,调整pH至7.4,分装于试管内,每管1.0mL,121℃高压灭菌15min。 
A4 营养琼脂
牛肉膏 3.0g
蛋白胨 20.0g
氯化钠 5.0g
琼脂 20.0g
蒸馏水 1 000.0mL
将各成分加于蒸馏水中,煮沸至完全溶解,补足失去的水分,调整pH至7.2,过滤,121℃ 高压灭菌 20 min 。待冷至 50℃左右时,倾注于平皿,制成平板。   
   

 

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