微量热法研究头孢菌素对大肠杆菌微生物活性的影响——2

1实验部分
1．1仪器和材料
    实验采用瑞典ThermometricAB公司的微量量热仪，恒温工作范围为5～60℃，可维持±0.02℃不变，热功率最小检测限为2．5uw．
    培养液为LB(Luria—Be~ani)培养基：将5gNaC1、5g胰蛋白胨和2.5g酵母浸粉，溶于500mL去离子水中，调节pH值至7．2，在120℃下高压灭菌20min，在冰箱中放置备用．大肠杆菌DH5a由大连化学物理研究所生物质高效转化课题组提供，于-2O℃下保存菌种，实验时取菌种接种于10mLLB培养基中，于37℃下振荡培养过夜，再以体积分数为2％的接种量接入10mLLB培养基中，于37℃下振荡至OD600=0．5．头孢哌酮钠和头孢哌酮钠舒巴坦钠由湖南省药品检验所提供．
1．2实验方法
    实验采用安瓶法：即将10mLLB培养基置于20mL已灭菌的玻璃安培瓶中，加入不同浓度的头孢菌素，然后将大肠杆菌DH5a接种到上述溶液中，接种量约为10cells／mL．将装有相同体积培养液的安培瓶作为参比，将上述安培瓶密封后分别放入量热仪的测量和参比通道中，该系统的温度控制为37℃，由计算机开始自动记录实验数据．   
   
   

 

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