我国进出口检验行业标准-副溶血性弧菌检验方法——3

9　培养基及试剂 
9.1 30 g/L氯化钠稀释液　　
氯化钠 30.0g;　　
蒸馏水1000mL　　
  加热溶解,调至pH7.0,121℃高压灭菌15  min,以无菌操作分装于500mL广口瓶或500mL三角瓶,每瓶450 mL以及17mm×170mm试管,每管9mL,做稀释样品用。 
9.2 60  g/L　氯化钠蛋白胨水(PW)　　
蛋白胨 10.0g　　
氯化钠 60.0g　　
蒸馏水　 1000mL 　　
  将各成分加热溶解,调至pH7.2,分装于17mm×170mm试管,每管10mL。120℃高压灭菌15min。 
9.3　氯化钠多粘菌素B肉汤(SPB) 　　
酵母浸膏　 3.0g　　
蛋白胨 10.0g　　
氯化钠 20.0g　　
多粘菌素B 250单位/毫升培养基　　
蒸馏水　 1000mL 　　
  将各成分(除多粘菌素B外)加热溶解,稍冷后加入多粘菌素B,调至pH7.4。分装于17mm  ×170mm试管,每管10mL。121℃高压灭菌15min。灭菌后,立即将培养基取出放凉。 
9.4　硫代硫酸钠、柠檬酸钠、胆盐、蔗糖琼脂(TCBS) 　　
酵母浸膏 　　5.0g　　
蛋白胨 　　　10.0g　　
氯化钠 　　　10.0g　　
柠檬酸钠 　　10.0g　　
硫代硫酸钠 　10.0g 　　
胆酸钠(以牛胆酸钠代替)　3.0g　　
牛胆汁粉(以混合胆盐代替)　5.0g　　
蔗　糖 　　　20.0g　　
柠 檬酸铁　 　1.0g　　
琼　脂 　　　18.0g　　
溴麝香草酚蓝　0.04g　　
麝香草酚蓝　 0.04g　　
蒸馏水 　　　1000mL 　　
  除指示剂外,将各种成分加热溶解,调至pH8.6,加入指示剂。此培养基不必高压灭菌,煮沸1～2min,待培养基稍凉后倾注平板。　　在该平板上,溶藻胶弧菌为黄色菌落,而副溶血性弧菌为蓝绿色菌落。肠球菌、变形菌及大肠菌群有时也会生长,但其菌落一般较小,易与副溶血性弧菌区别。 
9.5　氯化钠三糖铁琼脂(TSI)　　
牛肉浸膏　　3.0g　　
蛋白胨 　　20.0g　　
乳 糖 　　 10.0g　　
蔗　糖 　　10.0g　　
葡萄糖　　 1.0g　　
硫酸亚铁 　0.5g　　
硫代硫酸钠　 0.5g　　
氯化钠 　　30.0g　　
琼　脂 　　12.0g　　
酚　红　　　0.024g　　
  除琼脂和酚红外,将其他成分用蒸馏水400mL微火加热溶解,同时将琼脂置于600mL蒸馏水中,浸泡数分钟后,加热煮沸使完全溶解。然后将以上两液混合均匀。调至pH7.4,  加入指示剂混匀,分装于15mm×0mm试管,每管3～4mL,115℃高压灭菌15min。灭菌后摆成斜面,使高层和斜面各约3cm。 
9.6　嗜盐性试验用胰胨水(TB)　　
胰　胨 　40.0g　　
酵母浸膏 12.0g　　
蒸馏水　　 4000mL 　　
  完全溶解后,分成4份,其中3份分别加入30g、70g、100g氯化钠,使成0％、30g/L、  70g/L、00g/L不同浓度的氯化钠胰胨水。调至pH7.5。分装15mm×150mm试管,每管7mL。 121℃高压灭菌15min。    
   

 

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