出口食品中大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌检验方法——4

        附录A　 培养基和试剂 　　　　(补充件)
A1　月桂基硫酸盐胰蛋白(月示)(LST)肉汤　　
胰蛋白(月示)或胰酪胨(Trypticase)　　20g 　　
氯化钠　　　　　　　　　　　　　　　5.0g　　
乳糖　　　　　　　　　　　　　　　　5.0g　　
磷酸氢二钾(K2HPO4)　　　　　　　　　2.75g 　　
磷酸二氢钾(KH2PO4)　　　　　　　　　2.75g　　
月桂基硫酸钠　　　　　　　　　　　　0.1g　　
蒸馏水　　　　　　　　　　　　　　　1000.0mL　　
   将各成分溶解于蒸馏水中。分装到有倒立发酵管的20mm×150mm试管中,每管10mL。121℃高压灭菌15min。最终pH6.8±0.2。
A2　煌绿乳糖胆盐(BGAB)肉汤　　
蛋白胨 　　　　　　　　　　　　10.0g　　
乳糖　　　　　　　　　　　　　 10.0g　　
牛胆粉(oxgall或oxbile)溶液　　 200.0mL 　　
0.1％煌绿水溶液　　　　　　　　13.3mL 　　
蒸馏水                         1000ml　　
  将蛋白胨乳糖溶于约500mL蒸馏水中,加入牛胆粉溶液200mL(将20.0g脱水牛胆粉溶于200 mL蒸馏水中,pH7.0～7.5),用蒸馏水稀释到975mL,调pH7.4。再加入0.1％煌绿水溶液13.3mL,用蒸馏水补足到1000mL,用棉花过滤后,分装到20mm×150mm试管(管内有倒立的小发酵管)中,每管10mL。121℃高压灭菌15min。最终pH7.2±0.1。
A3 EC肉汤　　胰蛋白(月示)或胰酪(月示) 20.0g　　
3号胆盐或混合胆盐　　　　 1.5g 　　
乳糖　　　　　　　　　　　5.0g　　
磷酸氢二钾(K2HPO4)　　　　4.0g 　　
磷酸二氢钾(KH2PO4)　　　　1.5g　　
氯化钠　　　　　　　　　　5.0g 　　
蒸馏水　　　　　　　　    1000.0mL 　　
  将以上成分溶解于蒸馏水中,分装16mm×150mm试管(管内有倒立的小发酵管),每管8mL。121℃高压灭菌15min,最终pH6.9±0.1。
A4　伊红美蓝琼脂(EMB)　　
蛋白胨　　　　　　 10.0g 　　
乳糖 　　　　　　　10.0g 　　
磷酸氢二钾(K2HPO4) 2.0g 　　
琼脂　　　　　　　 15.0g　　
伊红γ(水溶性)　　  0.4g或2％水溶液20mL 　　
美蓝　　　　　　　 0.065g或0.5％水溶液13mL 　　
蒸馏水　　　　　　 1000.0mL　　
  在1000mL蒸馏水中煮沸溶解蛋白胨、磷酸盐和琼脂,加水补足至原量。分装于三角烧瓶中。每瓶100mL或200mL,高压灭菌15min。最终pH7.1±0.2。使用前将琼脂融化,于每100mL琼脂中加5mL灭菌的20％乳糖水溶液、2mL的2％伊红γ水溶液和1.3mL0.5％的美蓝水溶液,摇匀,冷至45～50℃倾注平皿。   
   

 

上一篇：出口食品中大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌检验方法——3

下一篇：出口食品中大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌检验方法——5