进出口行业标准-出口食品沙门氏菌属(包括亚利桑那菌)——4

6.5.4　煌绿水溶液
煌　绿　 0.5g
蒸馏水   100.0mL
溶解后,存放暗处,不少于1d,使其自然灭菌。
6.5.5　牛胆盐溶液
牛胆盐 10.0g
蒸馏水 100.0mL 
加热煮沸至完全溶解,高压灭菌121℃,20 min。
6.5.6　制备
基础液            900.0mL
硫代硫酸钠溶液    100.0mL
碘溶液　　　　　　20.0mL
煌绿水溶液　　　  2.0mL
牛胆盐溶液        50.0mL
临用前,按上列顺序,以无菌操作依次加入基础液中,每加入一种成分,均应摇匀后再加入另一种成分。最后分装于灭菌玻璃瓶内,每瓶100mL或225mL。
6.6　亚硫酸铋琼脂(BS)
蛋白胨　　　 10.0g
牛肉膏　　　 5.0g
葡萄糖　　　 5.0g
硫酸亚铁　　 0.3g
磷酸氢二钠 　4.0g
煌　绿　　　 0.025g或5g/L水溶液5mL
柠檬酸铋铵   2.0g
亚硫酸钠　　 6.0g
琼　脂       18.0g 
蒸馏水　　　1000.0mL
将前三种成分加入300 mL蒸馏水中(制作基础液),硫酸亚铁和磷酸氢二钠分别加入 20mL和30mL蒸馏水中,柠檬酸铋铵和亚硫酸钠分别加入另一20mL和30mL蒸馏水中,琼脂加入600mL蒸馏水中。然后分别搅拌均匀,静置约10min,加热煮沸至完全溶解。冷至80℃ 左右时,先将硫酸亚铁和磷酸氢二钠混匀,倒入基础液中,混匀。将柠檬酸铋铵和亚硫酸钠混匀,倒入基础液中,再混匀。调至pH7.5±0.1,随即倾入琼脂液中,混合均匀,冷至 50～55℃。加入煌绿溶液,充分混匀后立即倾注平皿,每皿约20mL。
本培养基不需要高压灭菌,在制备过程中不宜过分加热,避免降低其选择性,新配制的培养基呈玉白色不透明,贮于室温暗处,超过48h会降低其选择性,本培养基宜于当天制备,第二天使用。
6.7　胆硫乳琼脂(胆盐　硫化氢　乳糖琼脂 DHL)
蛋白胨      20.0g
牛肉膏　　　3.0g 
乳　糖      10.0g
蔗　糖      10.0g
牛胆盐　　　2.0g
硫代硫酸钠　2.2g
柠檬酸钠　　1.0g
柠檬酸铁铵　1.0g 
中性红　　　0.03g或5g/L水溶液6mL
琼　脂      16.0g
蒸馏水　　　1000.0mL
除中性红和琼脂外,将其他成分加入400 mL蒸馏水中,搅拌均匀,静置约10 min,加热煮沸至完全溶解,调至pH7.3±0.1。另将琼脂加入600mL蒸溜水中,搅拌均匀,静置约 10min,加热煮沸至完全溶解。将两种溶液混合后,再加入5g/L中性红水溶液6mL,搅拌均匀,冷至50～55℃,倾注平皿,每皿约20mL。
本培养基不需高压灭菌,也不再进行任何加热。制成的平板为橙黄色。    
   

 

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