1 主题内容与适用范围
本标准规定了用4-甲基伞形酮辛酯试剂快速检验出口食品中沙门氏菌的方法。
本标准适用于出口肉品、蛋品沙门氏菌的检验,其他食品可参照使用。
2 引用标准SN 0170 出口食品中沙门氏菌(包括亚利桑那菌)检验方法
3 符号MUCAP:4-methylumbelliferyl-caprylate(4-甲基伞形酮辛酯)的缩写。MUCAP:试剂:用4-甲基伞形酮辛酯配成的试剂的缩写。SS琼脂:沙门氏菌和志贺氏菌琼脂培养基。HE琼脂:Hektoen Enteric 琼脂培养基。
4 设备与材料
4.1 紫外光灯:波长366 nm,功率≥6W。
4.2 放大镜:3~4X。
4.3 毛细滴管。
5 培养基与试剂培养基与试剂按 SN 0170 第5章,另补充以下部分:
5.1 SS琼脂培养基(含1%蔗糖):见附录 A1。
5.2 HE琼脂培养基:见附录 A2。
5.3 MUCAP试剂:见附录 A3。
5.4 氧化酶试纸:见附录 A4。
6 样品制备及增菌培养参照SN 0170进行。
7 分离培养
7.1 将增菌培养液摇匀,挑取一接种环,划线接种于SS和HE琼脂培养基各一个,于36±1℃培养 24±2h。
7.2 观察各琼脂平板上有无可疑沙门氏菌菌落。如无可疑菌落,应再继续培养24±2h。沙门氏菌的菌落特征见表 1。
表 1 沙门氏菌属菌落特征
培养基 菌 落 特 征
SS平板 圆形,边缘整齐;淡黄色,半透明,有或无黑色中心;周围培养基透明淡黄色
HE平板 圆形,边缘整齐;蓝绿色至蓝色,有或无黑色中心;周围培养基透明墨绿色
8 测定
8.1 从培养的分离培养基上选可疑沙门氏菌菌落(尽量选较大、分离较好的单个菌落),用玻璃笔做好标记并编号。
8.2 用毛细滴管吸取 MUCAP试剂,加一滴于编号的菌落上。待一个平板的被检菌落全部滴加试剂后,将平板拿至366nm紫外光灯下检视。发蓝色荧光的为 MUCAP试验阳性,将阳性菌落号记录下来。
8.3 用接种环挑取荧光反应阳性菌落,涂于氧化酶试纸上,观察涂菌点是否变蓝色。于10min内变蓝色为氧化酶试验阳性;不变色为阴性。
9 结果的报告
9.1 MUCAP试验阴性的样品,报告为“未检出沙门氏菌”
9.2 MUCAP试验阳性氧化酶试验阴性的样品,按SN 0170第四章继续进行生化和血清学试验,并根据试验结果报告。
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