致病性嗜水气单胞菌检验方法——GB 4

A6脱脂奶蔗箱胰蛋白膝平板 
    磷酸二氢钾(KH2P04)                10.0g 
    氯化钾(KCI）                      1.5g
    蔗糖                               5.0g
    胰蛋白陈                           5.0g
    脱脂奶粉                           10.0g 
    琼脂                                15.0g 
    蒸馏水                              1000ml 
 混匀，加热溶解，调PH至7.0，分装，112kPa高压灭菌15min，冷却至45℃，倾注灭菌平板。 
A7蔗精胰蛋白膝肉汤 
    磷酸二氢钾(KH2PO4)                 10.08 
    氯化钾(KCl)                          1.5g 
    蔗糖                                 5.0g 
    胰蛋白陈                             5.0g 
    脱脂奶粉                            10.0g 
     蒸馏水                             1000mL 
馄匀，加热溶解，调PH至7.0分装，112kPa高压灭菌15min 。
                    附 录 B (标准的附录)各种试剂配制方法 
Bl Kovacs试荆 
    对二甲基氨基苯甲醛                   5.0g 
    戊醇                                 75g 
    浓盐酸                               25mL 
B2 草酸铁结晶紫染液 
    甲液 
    结晶紫                         2.0g 
    溶于95%乙醇20mL 
    乙液: 
    草酸铵                         0.8g 
    溶于蒸馏水80mI。 
    使用前将甲液和乙液混合。 
B3 革兰氏碘液 
    碘(I）                        1.0g 
    碘化钾(KI）                    2.0g 
    蒸馏水                         100mL 
B4 复红酒精染液 
    碱性复红                        0.4g 
    95%乙醇                       100mL 
B5 箱发酵试验管 
    先配蛋白脉水(蛋白脉5.0g,蒸馏水1000mL，调pH至7.4，分装，每瓶100mL).
    每100mL蛋白脉水中分别加人葡萄糖、蔗糖、阿拉伯糖、七叶昔及水杨昔1.0g，充分溶解，分装试管，106.44kPa高压灭菌10min, 
B 6 含吐温-20的磷酸盐缓冲液(PBST) 
    氯化钠(NaCI)                     8.0g 
    氯化钾(KCl)                      0.2g 
    磷酸氢二钠(Na2HP0,)              1.44g 
    磷酸二氢钾(KH,PO,)               0.24g 
    蒸馏水                           800mI 
 调pH至7.4，加水定容至980mL;吐温-80(Tween-80)20mL. 
B7 3,3一二氮基联苯胺一过妞化氮 
   先配二经甲基氨基甲烷一盐酸(Tris-HC1)缓冲液(氯化钠8.0g，氯化钾0.2g,Tris3.0g，蒸馏水800mL,调pH至7.4，加水定容至1000ml)。 
Tris-HCI缓冲液                           50ml 
二氨基联苯胺                             250mg
临用前取10ml,用蒸馏水10倍稀释至100ml，加30%过氧化氢300ul。   
   

 

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