实验九 荚膜染色法

一、基本原理
　　荚膜是包围在细菌细胞外面的一层粘液性物质，其主要成分是多糖类，不易被染色，故常用衬托染色法，即将菌体和背景着色，而把不着色且透明的荚膜衬托出来。荚膜很薄，易变形，因此，制片时一般不用热固定。
二、器材
　　圆褐固氮菌（Azotobacter chroococcum）；
　　荚膜染色液，纯甲醇等。
三、操作步骤
　　1．在载玻片一端滴一滴无菌水，取少许培养了72小时的圆褐固氮菌在水滴中制成悬液。取一滴新配好的黑色素溶液（也可用绘图墨水）与菌悬液混合，另取一块载玻片作为推片，将推片一端平整的边缘与菌悬液以30度角接触后，顺势将菌悬液推向前方，使其成匀薄的一层，风干。
　　2．用纯甲醇固定1分钟。
　　3．加番红液数滴于涂片上，冲去残余甲醇，并染30秒钟，以细水流适当冲洗，吸干后油镜检查，背景黑色，荚膜无色，细胞红色。
四、实验报告
　　绘图说明圆褐固氮菌菌体及荚膜的形状。   
   

 

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