食品卫生微生物学检验致泻大肠埃希氏菌检验1——GB

1.范围本标准规定了食品中致泻大肠埃希氏菌的检验方法。本标准适用于食品和食物中毒样品中致鸿大肠埃希氏菌的检验。
2.规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款．凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准．
3.设备和材料
3.1冰箱：O℃——4℃。
3.2恒温培养箱：36℃士1℃，42℃。
3.3恒温水浴锅：100℃，65℃——68℃，50℃。
3.4显微镜：10*——100*。
3.5离心机：3OO0r/min。
3.6酶标仪。
3.7均质器或灭菌乳钵。
3.8架盘药物天平：0g——500g，精确至0.5g。
3.9细菌浓度比浊管：MacFarland3号。
3.10灭菌广口瓶：500mL。
3.11灭菌锥形瓶：500mL,250mL。
3.12灭菌吸管：1mL（具0.01mL刻度）、5ml（具0.1mL刻度）。
3.13灭菌培养皿；直径90mm.
3.14灭菌试管：10mm*75mm、16mm*160mm。
3.15注射器：0.25mL，连接内径为1mm塑料小管一段。
3.16灭菌的刀子、剪子、镊子等．
3.17小白鼠：1日～4日龄。
3.18硝酸纤维素滤膜150mm*50mm，Φ0.45mm。临用时切成两张，每张75mm*50mm，用铅笔划格，每格6mm*6mm，每行10格，分6行。灭菌备用。
4.培养基和试剂
4.1乳糖胆盐发酵管：按GB/T4789.28一2003中4.9规定。
4.2营养肉汤：按GB/T4789.28一2003中4.8规定。
4.3肠道菌增菌肉汤：按GB/T4789.28一2003中4.18规定。
4.4麦康凯琼脂：按GB/T落789.28一2003中4.24规定。
4.5伊红美蓝琼脂（EMB)：按GB/T4789.28一2003中4.25规定。
4.6三糖铁琼脂（TSI)：按GB/T4789.28一2003中4.26,4.27规定。
4.7克氏双糖铁琼脂（KI)：按GB/T4789.28一2003中4.28,429规定。
4.8糖发酵管（乳糖、鼠李糖、木糖和甘露醇）：按GB/T4789.28一2003中3.2规定。
4.9赖氨酸脱梭酶试验培养基：按GB/T478928一2003中3.12规定。
4.10尿素琼脂（pH72)：按GB/T4789.28一2003中3.1苏规定。
4.11氰化钾（KC拜）培养基：按GB/T4789.28一2003中3.16规定。
4.12蛋白陈水、靛基质试剂：按GB/T4789.28一2003中3.13规定。
4.13半固体琼脂：按GB/T478928一2003中4.30规定。
4.14Honda氏产毒肉汤：按GB/T4789.28一2003中4.34规定。
4.15Elek氏培养基：按GB/T4789.28一2003中4.35规定。
4.16氧化酶试剂；按GB/T478928一2003中3.18规定。
4.17革兰氏染色液：按GB/T4789.28一2003中2.2规定．
4.18致病性大肠埃希氏菌诊断血清、侵袭性大肠埃希氏菌诊断血清、产肠毒素大肠埃希氏菌诊断血清、出血性大肠埃希氏菌诊断血清。
4.19产肠毒素大肠埃希氏菌LT和ST酶标诊断试剂盒。
4.20产肠毒素LT和ST大肠埃希氏菌标准菌株。
4.21抗LT抗毒素。
4.22多粘菌素B纸片：300IU，Φ16mm。
4.23 0.1％硫柳汞榕液。
4.24 2％伊文思蓝溶液。
5.检验程序：致泻大肠埃希氏菌检验程序见图1（略）。   
   

 

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