食品卫生微生物学检验霉菌和酵母计数2—GB

6操作步骤
6.1以无菌操作称取检样25g（mL)，放入含225mL灭菌水的具玻塞锥形瓶中，振摇30min，即为1：10稀释液。
6.2用灭菌吸管吸取1：10稀释液10mL，注人灭菌试管中，另用1ml灭菌吸管反复吹吸邹次，使霉菌抱子充分散开。
6.3取1ml 1：10稀释液注入含有9ml灭菌水的试管中，另换一支1ml灭菌吸管吹吸五次，此液为1：100稀释液。
6.4按上述操作顺序做10倍递增稀释液，每稀释一次，换用一支1ml灭菌吸管，根据对样品污染情况的估计，选择三个合适的稀释度，分别在做10倍稀释的同时，吸取1mL稀释液于灭菌平皿中。每个稀释度做两个平皿，然后将晾至45℃左右的培养鉴注人平皿中，并转动平皿使之与样液混匀，待琼脂凝固后，倒置于25℃～28℃温箱中，3d后开始观察，共培养观察5d。
6.5计算方法：通常选择菌落数在10～150之间的平皿进行计数，同稀释度的两个平皿的菌落平均数乘以稀释倍数，即为每克（或毫升）检样中所含霉菌和酵母数。稀释度选择及菌落报告方式可参考GB/T4789.2.6.6报告：每克（或毫升）食品所含霉菌和酵母数以cfu/g(mL）表示。
7、霉菌直接镜检计数法霉菌直接镜检计数法见附录A
附录A（资料性附录）霉菌直接镜检计数法
常用的为郝氏霉菌计测法，本方法适用于番茄酱罐头。
A.1设备和材料
A.1.1折光仪。
A.1.2显微镜。
A.1.3郝氏计测玻片：具有标准计测室的特制玻片。
A.1.4盖玻片。
A.1.5测微器：具标准刻度的玻片。
A.2操作步骤
A.2.1检样的制备：取定量检样，加蒸馏水稀释至折光指数为1.3447—1.3460（即浓度为7.9%—8,8%)，备用。
A.2.2显微镜标准视野的校正：将显微镜按放大率90倍一125倍调节标准视野，使其直径为1.382mm.
A.2.3涂片：洗净郝氏计测玻片，将制好的你准液，用玻璃棒均匀的摊布于计测室，以备观察。
A.2.4观测：将制好之载玻片放于显微镜标准视野下进行霉菌观测，一般每一检样观察孙个视野，同一检样应由两人进行观察。
A.2.5结果与计算：在标准视野下，发现有霉菌菌丝其长度超过标准视野（1.382mm）的六分之一或三根菌丝总长度超过标准视野的六分之一（即测微器的一格）时即为阳隆（+)，否则为阴性（一），按100个视野计，其中发现有霉菌菌丝体存在的视野数，即为霉菌的视野百分数。   
   

 

上一篇：食品卫生微生物学检验霉菌和酵母计数1—GB

下一篇：食品卫生微生物学检验肉与肉制品检验——GB