1、范围
本标准规定了食品中常见的常见产毒霉菌的鉴定方法。
本标准适用于曲霉属、青霉属、镰刀菌属及其他菌属的产毒霉菌鉴定。
2、规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有的修改单〔不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准。GB/T4789.28一20此食品卫生微生物学检验染色法、培养基和试剂
3、设备和材料
3.1冰箱:O℃~4℃。
3.2恒温培养箱:25℃—28℃
3.3显微镜:IOX—100X。
3.4目镜测微计。
3.5物镜测微计,
3.6无菌接种罩。
3.7放大镜。
3.8滴瓶
3.9接种勾针。
3.10分离针。
3.11载玻片。
3.12盖玻片:18mm*18mm。
3.13灭菌刀子。
4、培养基和试剂
4.1乳酸—苯酚液:按GB/T4789.28一2003中3.24规定。
4.2察氏培养基:按GB/T4789.28一2003中4.77规定。
4.3马铃薯—葡萄糖琼脂培养基:按GB/T4789.28一2003中4.78规定。
4.4马铃薯琼脂培养基:按GB/T4789.28一2003中4.79规定。
4.5玉米粉琼脂培养基:按GB/T4789.28一2003中4.81规定。
5、操作步骤
5.1菌落的观察:为了培养完整的巨大菌落以供观察记录,可将纯培养物点植于平板上。方法是:将平板倒转,向上接种一点或三点.每菌接种两个平板,倒置于25℃~28℃温箱中进行培养。当刚长出小菌落时,取出一个平皿,以无菌操作,用小刀将菌落连同培养基切下1cm*2cm的小块,置菌落一侧,继续培养,于5d—14d进行观察。此法代替小培养法,可直接观察子实体着生状态。
5.2斜面观察:将霉菌纯培养物划线接种(曲霉、青霉)或点种〔链刀菌或其他菌)于斜面,培养5d—14d,观察菌落形态,同时还可以将菌种管置显微镜下用低倍镜直接观察孢子的形态和排列。
5.3制片:取载玻片加乳酸一苯酚液一滴,用接种针钩取一小块霉菌培养物,置乳酸一苯酚液中,用两支分离针将培养物撕开成小块,切忌涂抹,以免破坏霉菌结构;然后加盖玻片,如有气泡.可在酒精灯上加热排除。制片时最好是在接种罩内操作,以防孢子飞扬。5.4镜检:观察霉菌的菌丝和孢子的形态和特征、孢子的排列等,并做详细记录。5.5报告:根据菌落形态及镜检结果,参照以下各种霉菌的形态描述及检索表,确定菌种名称.
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