嗜酸乳杆菌酸耐受性的研究_3

3 结果与讨论 
3.1 4株嗜酸乳杆菌的耐酸力评价 
 4株嗜酸乳杆菌菌株ATCC4356、La-IM1、La-IM2和La-IM3在pH2.5 的PBS 缓冲液中作用3h 后的活菌数分别为：2.92 ×108、1.2 ×108、1.13 ×109和 1.18 ×108 CFU/mL，存活率分别为：73.92%、70.91%、102.72%和83.69%。活菌数均大于108CFU/mL，存活率均高于60%，证明4 株嗜酸乳杆菌在pH 为2.5 的条件下酸耐受性较好，其中菌株La-IM2 的酸耐受性最高。 另外，菌株La-IM2 的存活率超过100%，原因可能是该菌株来自于开菲尔粒，而开菲尔粒的发酵酸度很高，该菌株经过长期低pH 值的酸适应后，菌株的酸耐受性进一步增加，因而变得较另外3株嗜酸乳杆菌菌株更为耐酸；其次，本实验采用MRS 液体培养基调节pH 值作为菌株的酸耐受基质，使得较耐酸的该菌株可以在其中继续生长，菌液浓度进一步升高，存活率超过 100%。
3.2嗜酸乳杆菌La-IM2 的生长曲线的测定结果
 嗜酸乳杆菌La-IM2的生长曲线可知，在2h的时候该菌即可进入对数期生长，在10h后开始进入稳定期。随着培养时间的延长，培养基中的pH值逐渐降低，24h后降低为3.6，这说明该菌生长速率较快，产酸能力较强，适合于作益生菌菌株。
3.3 嗜酸乳杆菌La-IM2在不同pH 条件下的酸耐受性评价结果 
  嗜酸乳杆菌La-IM2在pH 1.5、pH 2.5、pH 3.5、pH 4.5、pH 7.2条件下作用1.5h后的活菌数分别为1.42 ×106、2.96 ×108、5.45 ×108、3.85 ×108、3.95×108CFU/mL；在3h后的活菌数分别为0、2.92 ×108、4.80 ×108、4.15 ×108、3.60 ×108 CFU/mL。该菌在pH 1.5 时培养3h后几乎没有活菌的存在，而培养 1.5h后的活菌数仍然在 106CFU/mL 以上，且其他作用条件下的活菌数均在108CFU/mL 以上，证明该菌株酸耐受性非常好。
  通过模拟胃酸pH 值条件下的酸耐受性实验，证明嗜酸乳杆菌可以以较高的活菌数顺利过胃，进而起到益生菌的作用（国际乳品联合会IDF推荐益生菌浓度＞ 107CFU/g 时能顺利到达小肠并发挥益生作用）。但是，由于时间原因，本实验只对嗜酸乳杆菌La-IM2 在模拟胃酸pH 条件下的耐受性进行了评价，没有对其在模拟胃液环境下的存活率进行测定，因而不能完全说明该菌可以以较高的活菌数过胃。还需要进一步实验，以测定其在模拟胃液环境下的活菌数，最终证实其是否具有益生功效。
4 结 论
（1）4株嗜酸乳杆菌ATCC4356、La-IM1、La-IM2和La-IM3 在pH2.5 ，3h 条件下的酸耐受性较高，活菌数均大于108CFU/mL，存活率均高于60%。其中菌株La-IM2 的酸耐受性最高，活菌数达到 1.13 ×109 CFU/mL。
（2）嗜酸乳杆菌La-IM2满足典型的对数生长曲线规律，在2h 时该菌进入对数期生长，10h后进入稳定期。说明该菌生长速率很快，产酸能力较强，适合于用作益生菌菌株。
（3）嗜酸乳杆菌La-IM2虽然在pH1.5 时作用3 小时后活菌数为0，但是在其他作用条件下的活菌数均在 108CFU/mL以上，证明该菌株在模拟胃酸pH 条件下的耐受性较好，可以通过胃液的低酸性环境进而发挥益生功效。    
   

 

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