金黄色葡萄球菌计数——2008GB

一、培养基明细：
    名称                                 规格    价格（元）
胰酪胨大豆肉汤（TSB）                   250g       85
Baird-Parker琼脂基础                      250g       225
亚碲酸盐卵黄增菌液                       5ml*10     65
脑心浸液肉汤（BHI）                      250g       120
兔血浆                                   0.5ml*10    65
磷酸盐缓冲液(PH7.2)  PBS                  250g       80
营养琼脂斜面                              250g       80
革兰氏染色液                               5ml*8      40
无菌生理盐水                                *          *
1mol/l的NaOH                               *          *
1mol/l的HCL                                *          *  
二、备注
1、金黄色葡萄球菌
   金黄色葡萄球菌是人类化脓感染中最常见的病原菌，可引起局部化脓感染，也可引起肺炎、伪膜性肠炎、心包炎等，甚至败血症、脓毒症等全身感染。
2、胰酪胨大豆肉汤，其配方与10%氯化钠胰酪胨大豆肉汤相同，即为TSB。
3、革兰氏染色液：
（1）结晶紫染色液
  成分：
     结晶紫           1.0g
     95%乙醇          20.0ml
     1%草酸铵水溶液   80.0ml
  制法：将结晶紫完全溶解于乙醇中，然后与草酸铵溶液混合。
（2）革兰氏碘液
  成分
     碘                1.0g
     碘化钾            2.0g
     蒸馏水            300ml
  制法：将碘与碘化钾先行混合，加入蒸馏水少许充分振摇，待完全溶解后，再加蒸馏水至300ml。
（3）沙黄复染液
  成分
     沙黄        0.25g
     95%乙醇    10.0ml
     蒸馏水      90.0ml
   制法：将沙黄溶于乙醇中，然后用蒸馏水稀释。
（4）试验方法
     涂片在火焰上固定，滴加结晶紫染液，染1min，水洗。
     滴加革兰氏碘液，染色1min，水洗。
     滴加95%乙醇脱色15—30s，直至染色液被洗掉，不要过分脱色，水洗。
     滴加复染液，复染1min，水洗，待干，镜检。   
   

 

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