鲜乳中抗生素残留检验——2008GB

一、培养基明细：
    名称                         规格       价格（元）
营养琼脂（NA）                    250g        80
2，3，5-氯化三苯四氮唑(TTC)       10g         135
溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨培养基        250g        75
脱脂乳                             *           *
青霉素G参照溶液                    *           *
磷酸盐缓冲液(PH7.2)  PBS          250g         80
二、备注
1、湿热链球菌抑制法：
   样品经过80℃杀菌后，添加嗜热链球菌菌液。培养一段时间后，嗜热链球菌开始增殖。这时候加人代谢底物2,3,5一氯化三苯四氮哇（TTC)，若该样品中不含有抗生素或抗生素的浓度低于检测限，嗜热链球菌将继续增殖，还原TTC成为红色物质。相反，如果样品中含有高于检测限的抑菌剂，则嗜热链球菌受到抑制，因此指示剂TTC不还原，保持原色。
2、嗜热脂肪芽胞杆菌抑制法
    培养基预先棍合嗜热脂肪芽胞杆菌芽胞，并含有pH指示剂（澳甲酚紫）。加人样品并孵育后，若该样品中不含有抗生素或抗生素的浓度低于检测限，细菌芽胞将在培养基中生长并利用糖产酸，pH指示剂的紫色变为黄色。相反，如果样品中含有高于检测限的抗生素，则细菌芽胞不会生长，pH指示剂的颜色保持不变，仍为紫色。
3、湿热链球菌抑制法判断方法
   在白色背景前观察，试管中样品呈乳的原色时，指示乳中有抗生素存在，为阳性结果。试管中样品呈红色为阴性结果。如最终观察现象仍为可疑，建议重新检测。
4、嗜热脂肪芽胞杆菌抑制法判断方法
   在白色背景前从侧面和底部观察小试管内培养基颜色。保持培养基原有的紫色为阳性结果，培养基变成黄色或黄绿色为阴性结果，颜色处于二者之间，为可疑结果。对于可疑结果应继续培养30min再进行最终观察。如果培养基颜色仍然处于黄色一紫色之间，表示抗生素浓度接近方法的最低检出限，此时建议重新检测一次。
5、4%2,3,5一氯化三苯四氮哇（TTC）水溶液
  成分   
      2,3,5一氯化三苯四氮哩（TTC)   1g
      灭菌蒸馏水                    5mL
  制法  
    称取TTC，溶于灭菌蒸馏水中，装褐色瓶内于2℃一5℃保存。如果溶液变为半透明的白色或淡褐色，则不能再用。临用时用灭菌蒸馏水5倍稀释，成为4％水溶液。
6、青霉素G参照溶液
 成分 
    青霉素G钾盐      30.0mg
    无菌磷酸盐缓冲液  适量
    无抗生素的脱脂乳  适量
 制法    精密称取青霉素G钾盐标准品，溶于无菌磷酸盐缓冲液中，使其浓度为100IU/mL—1000IU/ml。再将该溶液用灭菌的无抗生素的脱脂乳稀释至0.006IU/mL，分装于无菌小试管中，密封备用。-20℃保存不超过6个月。   
   

 

上一篇：金黄色葡萄球菌计数——2008GB

下一篇：双歧杆菌检验—2008GB