标准化的微生物采集方法
（一）基本原则
1、发现感染应及时采集微生物标本作病原学检查，二、三级医院微生物标本送检率不应低于70%。
2、尽量在抗菌药物使用之前采集标本。
3、标本采集时应严格无菌操作，减少或避免机体正常菌群及其它杂菌污染。
4、标本采集后应立即送至细菌室。床旁接种可提高病原菌检出率。
5、以棉拭子采集的标本如咽拭子、肛拭或伤口拭子，宜插入运送培养基送检。
6、送检标本应注明来源和检验目的，使细菌室能正确选用相应的培养基和适宜的培养环境。
（二）血液与骨髓的送检方法
1、通常采血部位为肘静脉。疑似细菌性心内膜炎时，以肘动脉或股动脉采血为宜，切忌在静滴抗菌药物的静脉处采取血标本。
2、采血部位的局部皮肤应严格消毒。将采集的血液注入血培养瓶前，应更换针头或过火消毒针头。
3、每次采血量成人5~10ml，婴幼儿1~2ml，培养基与血液之比以10：1为宜，以稀释血液中的抗生素。
4、怀疑菌血症因尽早采血，体温上升阶段采血可提高阳性率，但要防止因等待而延误时机。对已用抗菌药物而不能停药者，可在下次用药前采血。
5、对疑为细菌性骨髓炎或伤寒病人，在病灶或髂前（后）上棘处严格消毒后抽取骨髓1ml 作细菌培养。
（三）尿液的送检方法
1、中段尿：女性采样前应先用肥皂水或0.1%高锰酸钾溶液冲洗外阴部及尿道口；男性须翻转包皮冲洗，用0.1%新洁尔灭消毒尿道口，灭菌纱布擦干后，收集标本。
2、导尿管导尿采样可减少污染。对留置导尿者，可用碘酒消毒尿道口处的导尿管壁，用联空针筒的细针斜穿管壁抽吸尿液；或拔去闭式引流的集尿袋，弃取导尿管前段尿液，留无污染的膀胱内尿液数毫升送检。不可从集尿袋的下端管口留取标本。
3、送检标本以晨起第一次尿为宜。
4、室温下尿标本担搁稍久可导致尿内细菌浓度明显增加而影响病原菌与污染菌的区分。不能立即送检者，可暂存4℃冰箱。
（四）痰标本的送检方法
1、咳痰：清水反复漱口后用力咳痰，从呼吸道深部咳出新鲜痰液于无菌容器送检。痰量极少者可用45℃10%氯化钠溶液雾化吸入导痰。
2、对咳嗽乏力或昏迷病人，可用吸痰管经鼻腔或口抵达气管腔内吸引痰液。用纤维支气管镜可直接在病灶部位采集高浓度的感染病原菌，但不能完全避免咽喉部正常菌群感染。
3、双侧肺部感染伴人工气道如气管切开或气管插管患者，可用吸痰管经人工气道估插至叶支气管水平吸引痰液。
4、痰标本不能及时送检者，可暂存4℃冰箱。室温下担搁数小时定植于口咽部的非致病菌呈过度生长而肺炎链球菌、葡萄球菌和流感嗜血杆菌检出率明显降低
（五）手术创口、烧伤创面于脓液
1、无菌生理盐水擦洗病灶表面后，用棉拭子采取病灶深部的脓液和分秘物，置运送培养基内送检。
2、对未溃疡的脓肿宜用碘酒、酒精消毒皮肤后，以无菌注射器抽取脓液送检；也可于切开脓肿时用无菌棉拭子采样。
3、采样前病灶局部应避免用抗菌药物或消毒剂。
（六）粪便的送检方法
1、排便后，挑取有脓血、黏液部分的粪便2~3g（液状粪便则取絮状物），盛于蜡纸袋内送检。
2、对不易获取粪便者或婴幼儿，可用肛拭采集。将拭子前端用无菌甘油水湿润。然后插入肛门约4~5cm（幼儿约2~3cm）处，轻轻旋转擦取直肠表面黏液后退出，置运送普及内送检。
（七）咽拭、口腔拭子的送检
1、病人清水漱口后，由检查者将其舌外拉时悬幽垂尽可能向外牵引，棉拭子越过舌根到咽后壁或悬幽垂的后侧，反复擦拭数次，插入运送培养基。棉拭子应避免触及舌、口腔黏膜和唾液。
对化脓性扁桃体炎或口腔念珠菌病，用棉拭
临床标本的处理
1、血标本
1． 1常见细菌
革兰阳性菌：肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、溶血性链球菌、粪肠球菌、类白喉棒状杆菌、产单核李斯特菌等。
革兰阴性菌：脑膜炎奈瑟菌、卡他布兰汉菌、伤寒沙门菌、流感嗜血杆菌、大肠艾希菌、变形杆菌、产汽肠杆菌、铜绿假单孢菌、肺炎克雷伯菌等。
1．2临床意义
血液培养应用于伤寒、副伤寒、化脓性细菌和其他革兰阴性杆菌引起的败血症的诊断。
目前引起败血症的细菌多为金黄色葡萄球菌和大肠艾希菌。
疥、痈和脓肿继发的败血症主要是金黄色葡萄球菌和溶血性链球菌引起。
尿道、胆、胃肠黏膜损伤引起的败血症以大肠艾希菌多见，其次为变形杆菌、产汽肠杆菌、葡萄球菌。
急性细菌性心内膜炎以金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、脑膜炎奈瑟菌常见；亚急性心内膜炎以草绿色链球菌多见，偶见肠球菌；化脓性心包炎以金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、肺炎链球菌多见。
血液病、肝硬化引起的败血症金黄色葡萄球菌和铜绿假单孢菌为主。
弥漫性血管内凝血以革兰阴性杆菌为主。
烧伤后败血症以铜绿假单孢菌为主。
3、 痰标本
常见细菌： 肺炎链球菌、化脓性链球菌、金黄色葡萄球菌、结核分枝杆菌；脑膜炎奈瑟菌、卡他布兰汉菌、肺炎克雷伯菌、大肠艾希菌、铜绿假单孢菌、沙雷菌、流感嗜血杆菌。
痰标本：须接种2个血平板,一个放普通孵箱,另一个放CO2孵箱.痰标本接种于血平板、麦康凯平板、巧克力平板。巧克力平板是用来筛选流感嗜血杆菌。肺炎链球菌和流感嗜血杆菌的检出率是衡量一个细菌室水平的重要依据，因此对于包括以上两种菌在内的苛养菌的鉴定应引起重视。痰标本接种时，第一区划完线后，接种环必须过火消毒，否则将达不到分区的效果。
痰标本建议接种2个血平板、一个巧克力平板、一个麦康凯平板。 痰标本于咽标本的处理基本相同。
4、 尿标本
常见细菌：大肠艾希菌、葡萄球菌、变形杆菌。
注意事项：尿标本不能离心，离心将使污染菌也集中于沉淀部分，导致错误结果。一般而言，菌落大于105/ml代表真正感染，103/ml以下表示污染，104～105为怀疑污染，如病人的排尿速度太快或接受药物治疗或尿的pH小于5.0，比重小于1.003时，细菌的数目可能降低。因此病人若已服用抗生素，104菌落即需进行鉴定和抗生素药敏试验。
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