组织培养配方研制

                            组织培养配方研制 
  组织培养配方设计
    组织培养配方的研制是组培技术的关键，但受材料，经验等因素的影响，实际生产中配方研究的方法千差万别，但总体来说还是有章可循的，简单介绍一些常用方法，以供参考。1、配方的研制方向
    1、去分化----诱导形成原球茎、愈伤组织、
    2、再分化芽----原球茎形成植株、不定芽形成植株、胚状体、珠茎、花芽、叶、鳞片母体组织直接产生小植株、无菌短枝扦插腋芽萌发
    3、芽苗伸长---小苗拔高，成为幼苗。
    4、再分化根--- 愈伤、茎部直接生根
    激素一般配比规律Skoog和Miller等所提出的生长素和激动素比例决定根和芽分化的观点，曾被大量的试验结果所证明 。因此二者的浓度和比例非常重要，其合适的配比就是常说的配方。狭义的配方，如：MS +BA2+NAA0。2广义的配方，如：B5 +BA2+NAA0.2+糖5g+活性碳10%+200C+琼脂6g
    1、去分化：生长素低；细胞分裂素高
    2、再分化：细胞分裂素高；生长素低
    3、茎伸长：赤霉素调节
    4、生根：生长素高；细胞分裂素低
    1.参阅外来配方：简单实用，节省时间，较为准确，效益突出。2.原配方的改造：如苹果枣组培快繁
    原分化培养基：MS+6-BA4.0+NAA0.3
    筛选分化培养基进行试验:以原配方ＢＡ4.0、NAA0.3为参照，设计4次重复,两两组合，则有16种配方组合，从中筛选ＢＡ、ＮＡＡ最佳组合。
    6-BA----2.0、3.0、4.0、6.0 ｍｇ/Ｌ 
    NAA-----0.05、0.1、0.3、0.5 ｍｇ/Ｌ 
    3.新配方的研制3.1完全设计(适合因素少，水平少的试验)正交设计
    正交试验设计法----它是以概率它是以概率论数理统计论数理统计、专业技术知识和实践经验为基础,充分利用标准化的正交表来安排试验方案，并对试验结果进行计算分析，最终达到减少试验次数，缩短试验周期，迅速找到优化方案的一种科学计算方法。
    我国从我国从20世纪世纪50年代开始，以中国科学院数学研究所为基础深入研究这门科学，并应用到工农业生产中去，得到了广泛推广成绩显著。正交法之所以受到人们的关注正交法之所以受到人们的关注。
    正交法应用中几个常用名词
    指标---在试验中需要考查的效果的特性值，与试验目相对应。例如 目的是提高产量，产量就是考查的指标；目的是降低成本，成本就成了考查的指标.指标一般分为定量指标和定性指标，通常把通常把定性指标通过评分定级等方法转化为定量指标。
    因素---试验中考查对试验指标可能有影响的原因或要素。通常用大写英文字母表示等来表示。一个字母表示一个因素。
    水平----试验中选定的因素所处的状态和条件称为水平或位级。
    用正交法安排试验方案可以解决以下问题：一是：可以节省大量人力、物力、财力和时间。
    二是：能够各因素的主次顺序，即了解哪些因素重要，哪些因素次要。
    三是：可以迅速找到优化方案，大大缩短产品开发周期；尽快使生产工艺按最佳工艺条件运行，早日实现高效益。
    四是：通过试验结果分析，可以进一步指明试验的方向，克服盲目性克服盲目性，
    可以归纳出正交实验的步骤：第一步：明确试验目的确定考查指标；
    第二步：确定因素、选取水平、制定因素水平表；
    第三步：选用合适的正交表进行表头设计；
    第四步：确定试验方案，做正交试验，记录试验结果；
    第五步：计算分析试验结果，选取优化方案；
    第六步：验证试验，确定最佳方案。
    3.4均匀设计是从均匀出发的设计，只考虑试验点的均匀分散性，让各点均衡地分布在试验范围内，使每个试验点有充分的代表性，水平多了，试验次数少了，在许多行业中取得了显著效果。
参阅：方开泰1994年著：《均匀设计与均匀设计表》.3.4简单对比  
   

 

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