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病毒的变异现象(二)



录入时间:2009-6-17 8:53:48 来源:青岛海博

5.对化学药剂的感受性变异  将盐酸胍、羟苯并咪唑、5溴脱氧尿核苷或盐酸金刚烷胺等病毒灭活剂或诱变剂添加于已经接种病毒的细胞培养物内,多次反复继代之后,常可分离获得抵抗甚至依赖这些药剂的变异毒株。例如Lidinko在培养脊髓灰质炎病毒的HeLa细胞的培养液内加入盐酸胍,获得了耐药性毒株。Nakano等应用类似方法甚至选育得到一株依赖胍的脊髓灰质炎病毒变异株,这类变异株不再能在无胍的细胞培养物内增殖。Eggers等也报道了依赖HBB的柯萨奇病毒和ECHO病毒。Oxford等(1970)将A2型流感病毒对小鼠作滴鼻感染,同时给以经口内服金刚烷胺,经过6代连续处理,获得了耐金刚烷胺的变异毒株。  Dubbs等和Stevens(1964)分别获得了耐受5溴脱氧尿核苷的痘苗病毒和依赖该药物的牛传染性鼻气管炎病毒变异株。Dinter等(1972)培育成功一株对丫啶黄有获得性抵抗力的牛腹泻粘膜病病毒的变异株。Rockborn等(1974)将这种抵抗性作为该病毒弱毒株的一个指标。Ghendon等(1972)和Katz等(1973)相继报道了抵抗乃至依赖靛红β缩氨基硫脲(IBT)的痘病毒变异株,在无IBT存在时,依赖株不能合成一种核芯结构多肽。痘苗病毒中已发现有抵抗利福平的变异株。  虽然病毒耐药性的具体例子尚不太多,而且大多是在病毒实验室内定向培育而成的。但是随着病毒化疗药物的增多,耐药现象可能将成为病毒化学治疗中一个需要充分注意和研究解决的问题。
6.营养变异  指病毒对某种营养物质的反应的变异。Dubes等发现脊髓灰质炎病毒在猴肾细胞内增殖时,必须有胱氨酸的存在才能形成蚀斑。他们应用培养液内不含胱氨酸的细胞培养这种病毒,迅速选育得到不需要胱氨酸甚至可被胱氨酸抑制的变异株。因为这种变异株是在没有胱氨酸存在的条件下产生的,因此排除了胱氨酸诱变的可能性。Chapin等曾应用在培养液内添加色氨酸的方法,选育获得一株依赖色氨酸的脊髓灰质炎病毒变异株。  
7.重组现象  指两个不同性状的病毒株在混合感染时,由于基因组某个或某些片段的交换,形成新的基因组合而出现“杂交”性状的子代病毒。  重组最先发现于噬菌体,随后在痘病毒、流感病毒、脊髓灰质炎病毒和呼肠孤病毒等多种动物病毒中观察到。一般来说,同种病毒的不同毒株之间容易发生重组,但重组也可发生于不同种和不同群病毒之间。  从广义上讲重组还包括交叉复活作用(cross reactivation)和多数感染复活作用(multplicity reactivation)。前者指可发生于活病毒与灭活病毒之间的重组,其子代病毒具备灭活病毒的某些性状;后者用以描述在以同株灭活病毒大量感染敏感细胞时,会产生活的感染性病毒的现象。一般认为,这是因为在灭活过程中,遭受破坏的病毒基因部位不同,发生了所谓的致死性变异。虽然对个体来说,这些病毒粒子都已灭活,但在用其大量感染敏感细胞时,由于取长补短,恢复了原毒株灭活前的所有基因结构而发生复活。从理论上讲,以灭活病毒感染培养细胞或者应用灭活疫苗接种人及动物,特别是在应用紫外线、羟胺和原黄素等不太强烈的灭活剂灭活的病毒制剂时,都存在着从中产生感染性活病毒的可能。实践中确已在新城疫病毒、流感病毒、痘病毒、呼肠孤病毒、口蹄疫病毒和脊髓灰质炎病毒中发现了多数感染复活现象。 
8.互补现象  同种(株)或异种(株)许多病毒粒子在混合感染同一细胞时,可能发生干扰现象,即一种(株)病毒的增殖抑制或干扰另一种(株)病毒的增殖。但也可能发生另一种情况:一种(株)病毒的增殖促进另一种(株)病毒的增殖,甚至为另一种(株)病毒增殖所必需。这一现象称为互补(complementation)。在第四章中所述的腺病毒与腺联病毒的关系,是典型的病毒互补现象。但是互补现象在痘病毒中也有明显的例子,在将加热灭活的强毒痘病毒和另一型无毒的活痘病毒同时接种动物时,常可发生强毒痘病毒的感染发病。这是因为痘病毒粒子中含有的一种依赖DNA的RNA聚合酶在加热时被破坏,而另一型无毒活痘病毒却可供应此酶,使灭活病毒粒子中尚未被破坏的DNA能够继续转录,进而完成增殖周期。  互补现象发现于同种病毒不同毒株之间、异种病毒之间以及活病毒与灭活病毒之间。应用互补试验,可以发现病毒结构中的功能单位及其与表型的关系。例如Padgatt等应用两个只能在34.5℃而不能在39.5℃增殖的兔痘病毒变异株(亦即前述的ts-突变株),混合感染猪肾细胞,置39.5℃培养。另以单株病毒同样感染的猪肾细胞作为对照,比较两者的病毒产量。结果发现混合感染培养物中的病毒产量为对照感染培养物中的1.4倍。证明混合感染的两株病毒发生了互补,而且兔痘病毒至少有2个功能部位在缺损时都可以引起ts突变。Bonnardiere(1972)在两个口蹄疫病毒ts-突变株之间引起互补,同样说明最少有2个部位的蛋白质合成,如果发生改变,都能引起ts-突变。

 

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