组培相关问题七

15.初代培养时,外植体出现发白,慢慢枯死,是什么原因的?
答:外植体的初代培养出现这种情况，是比较好理解的。大田植物材料离体以后，进入不同环境中继续生存代谢，需要一个过渡。首先，植物材料要吸收培养基的养分，不再是根吸收，盐类浓度相对于离体的植物材料的吸收能力可能是过量的，植物材料退色就是叶绿素形成受阻和细胞代谢受阻，另外还有培养基养分供应的有效性滞后，另外还有植物材料本身内含物向培养基的流失等等。建议在初代培养阶段最好先采用空白培养。

16.75%的酒精和70%的酒精有什么区别，组培时用那种好?
答:酒精的70%和75%都是可以的，但往往由于桶装酒精的浓度达不到95%，这样按照70%的配制就达不到要求了，因此我们一般是桶装按照75%的配，瓶装则用70%的配。

17.大型灭菌器在灭菌的时候总会出现个别瓶子破裂的现象，请教是什么原因？是温度过高，压力过大，还是内部冷热不均造成的呢？
答:高压灭菌造成玻璃瓶的破裂，特别是大型灭菌装置，我想最主要还是在放气冷却时造成的。究其原因，应该是在放气时，由于容积较大，压力在不同位置（内外部）的变化速度并不相同，致使瓶内与瓶外的压力差距较大，如果是封口膜，表现的可能就是塑料膜的破裂。

18.做培养基时可以用自来水吗。稀释药剂可以用吗。可以用砂糖吗。我看不懂培养基用量表。谢谢解答。主要是换算。如ms培养基硝酸钾用量1650mg，碘化钾0.025mg，甘胺酸0.0001mg。1mg，1l，1g到底是多少。我个人想自己做ms。没有分析天平。怎么办。
答:在实际生产中，自来水经过简单处理就可以作为组培用水。但若配药就需要用蒸馏水或纯净水。大量元素母液的配制可以根据实际需要进行选择倍数，比如硝酸钾用量1650mg/L，如配成20倍，就需称1.650*20=33g，以此类推，按照正确顺序溶解定溶到1L即可，配培养基时量取的体积就是1000/20=50ml，依次推算即可。
另外，如果您的配药条件不是很好，我建议可以应用干粉培养基，这样可以节省很多投资和时间。