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病毒病的免疫预防-弱毒(活)疫苗



录入时间:2009-6-19 13:46:59 来源:青岛海博

是指毒力已经充分致弱,但还保持能在动物体内增 殖,接种后能够引起 动物发生无症状的感染,从而激发机体产生坚强和持久免疫力的病毒制剂。弱毒(活)疫苗 分为自然毒株和人工致弱毒株两类。
(1)自然毒株: 在同一种病毒 的不同毒株之间, 存在着毒力和免疫原性等诸多方面的 差异。因此,寻找和筛选自然界中 毒力低而有较好免疫原性的病毒作为弱毒疫苗株,不仅在理论上是成立的,而且在实践中 也已证明这是一个有效的途径。目前广泛应用的预防鸡新城疫的新城疫病毒Ⅱ系弱毒疫苗 株和V4株,都是自然弱毒株。预防犬瘟热和犬细小病毒性肠炎的某些弱毒 疫苗分别也是由 分离到的自然弱毒株制备的。 应用具有交叉抗原的同属异种病毒强毒株也可 以进行疫病的免疫预防, 这种强毒株对于被接种动物来说不具有致病性, 但由于具有交叉保 护性抗原, 因此具有良好的免疫性。众所周知,Jenner应用牛痘病毒预防人的天花,是早期 预防医学的杰出成就之一。 应用鸽痘病毒预防鸡痘,应用火鸡疱疹病毒预防鸡的马立克氏病以及应用牛的轮状病毒口服 免疫小猪预防猪轮状病毒感染等,都是这方面的成功例证。
(2)人工致弱株:人工培养弱 毒株的方法, 主要有以下数种。
①连续通 过异种动物或异种动物细胞:这是培育弱毒(活)疫苗株的传统方法,原来不能在异种动物体 内或异种动物细胞上增殖的病毒,在长期多代的适应之后,逐渐具备了在新宿主体(或细胞) 内增殖的性能。这是一种纯粹的适应性变异呢?还是新宿主对变异病毒粒子的“选择性接受 ”?目前尚难作出定论。也可能这两种因素都起作用。为了较快育出能够适应新宿主的毒株 ,一个重要的原则就是必须采用大剂量的接种方法,也就是在每次传代接种时,都用尽可能 大量的病毒接种物。这与保持毒株稳定性状的传代方法恰恰相反,为了减少毒株的变异,传 代接种时应该采用最高稀释倍数也就是最小量的病毒接种物。一旦获得已经适应新宿主 的 变异毒株,并且证明它具有一定的稳定性能,即可进行对原宿主的毒力和免疫力鉴定。目 前广泛应用的猪瘟兔化弱毒(活)疫苗就是使猪瘟病毒连续通过家兔几百代而培育成的。将口 蹄疫病毒连续通过乳兔或乳鼠,也已获得弱毒疫苗株。牛瘟病毒在通过家兔、鸡胚等后,毒 力减弱而成为弱毒疫苗株。狂犬病病毒通过家兔育成的所谓“固定毒”,更是一个突出的例 子。通过异种动物细胞也能达到致弱病毒毒力的作用,并且已经被实践所证明。例如使乙 型脑炎病毒通过牛肾细胞、猴肾细胞或仓鼠肾细胞,均已分别获得了弱毒疫苗株。牛瘟病毒 通 过Vero细胞,犬瘟热病毒通过鸡胚细胞(先在鸡胚内适应几代),犬传染性肝炎病毒通过猪肾 细胞等,也都分别获得了弱毒疫苗株。
②在同种细胞上驯化: 某些病毒, 例如马传染性 贫 血病毒, 感染范围极窄, 除自然宿主动物及其细胞以外, 概不感染其它动物及细胞。 但 在敏 感细胞, 例如在马属动物体外培养的白细胞或其它细胞培养物上长期反复传代后, 也获得 了 弱毒疫苗株。 就是那些感染范围较宽的病毒, 例如脊髓灰质炎病毒和犬瘟热病毒, 分别 长 期通过猴肾细胞和犬肾细胞等敏感细胞培养传代后,毒力也减弱,并经蚀斑分离法等纯化手 段育成了 弱毒疫苗株。由于同种细胞不象异种动物细胞那样具有“适应性选择”作用,因此应该尽 早采用病毒纯化技术,以便尽快选出变异株。同时注意掌握培养温度、营养液的成分和pH、 收毒时间以及接毒量等有关因素。同种细胞驯化的另一个方法是应用现成的感染细胞 进行继代培养。例如伊泽等(1967年)以猪瘟强毒人工感染幼猪,随后采取其带毒的肾细 胞培养传代,由之获得了弱毒株。
 ③条件致死性温敏 突变株:主要是呼吸道病毒,在32~34℃上部呼吸道时能够有效地复制,在37℃下部呼吸道 时生长受到限制。筛选突变株时,首先利用致突变原对野生病毒诱导,使其发生无意突变, 然 后通过它们的温敏表型进行鉴定。如流感病毒的温敏突变株的选育就是通过该途径获得的。 温敏突变株的缺点是不太稳定,容易回复其毒力。相反, 采用相似的手段培育筛选的冷适 应突变株则具有相对稳定的特性。

 

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