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冬青苦丁茶树组织培养的研究二



录入时间:2009-6-24 15:40:09 来源:青岛海博

2.结果与分析
基本培养基对腋芽萌发的影响
外植体Ⅳ置于如表2 所示的培养基上培养,腋芽都能萌发生长,2 种外植体芽的平均萌动率大小及萌动时间的早晚顺序是E4 E2E3 El 。在E4 培养基上的外植体节间较长,展叶最快,小苗健壮;E2 E3 培养基诱导的小苗茎段粗壮,节间短,叶片较厚;在El 培养基上诱导的小苗节间短,生长较缓慢,基部生长无叶柄的叶片较多。
2.2
不同激素组合对腋芽萌动及生长的影响
2008 5 月的外植体Ⅳ 接种在表3 所示的培养基上培养,腋芽萌动快慢和萌动率大小最佳是E4 E8 培养基。
2.3
不同叶位的外植体芽萌发生长的差异性
外植体I 、Ⅱ 、Ⅲ 、Ⅳ 、V 分别置于E4 培养基上培养(表4 )。5 种外植体褐化率大小顺序是I 、Ⅱ 、Ⅲ 、Ⅳ 、V ,外植体Ⅲ 萌动最快,外植体I 萌动最晚。外植体Ⅲ 、Ⅳ 萌动天数短,萌动率较高。

2.4 不同季节材料腋芽萌动的差异性将2008 5 8 10 月取材的外植体Ⅳ 分别置于E4 培养基上培养,从表5 可看出,外植体萌动率及萌动快慢均为5 月>8 月>10 月,但污染率8 月份最高,其次是5 月、10 月。
2.5
不同培养基对试管苗增殖的影响

将试管苗外植体Ml MZ M3 分别接至E12 E13 E14 培养基上培养(表6 ) , 40d 后外植体MI 都未诱导出愈伤组织。在E12 E13 培养基上培养的外植体MZ ,其茎段基部都形成了愈伤组织,培养20d 左右,外植体上的腋芽都处于萌动状态,随后生长旺盛;而在E14 培养基上培养的外植体未诱导出愈伤组织,腋芽萌动比E12 E13 慢。在E12 E13 培养基上培养的外植体M3 ,其茎段切口处都形成愈伤组织,顶芽生长,但顶芽下的腋芽未见萌发生长;在E15 培养基上的外植体未能诱导出愈伤组织,顶芽虽能生长,但长势弱。
2.6
小苗生根培养对移栽成活的影响
试管苗置于E15 培养基上培养10 15d 后,移栽于蛙石中,在25 30 气温条件下半月左右即可发根,然后栽植土壤中,基本可以成活。

3 讨论
B5 MS MT 和改良White 4 种培养基的对比试验中,MT 培养基培养的外植体,腋芽萌发率最高,萌发速度最快,可能是MT 培养基的的无机成分、维生素等的组合较适合冬青苦丁茶生长。
在许多植物组织培养中,外植体本身的生理状况、休眠深度与植株再生相关。研究发现,5 月份取材的外植体腋芽萌动最快,萌动率最高;10 月份取材的外植体腋芽萌动最慢,萌动率最低;8 月份取材的外植体的腋芽萌动时间、萌动率介于5 月和10 月份之间,但污染率高。苦丁茶树系高大乔木,有很强的顶端优势。外植体随着木质化程度的增加,褐变率降低,萌动时间缩短,萌动率提高,但已形成驻芽的外植体芽萌动时间延长。研究中以顶芽下4 6 叶位的外植体萌动时间最短,萌动率最高,这可能与苦丁茶树生长特性有关。因此笔者认为,苦丁冬青的茎段培养宜在春季取半木质化的材料作为外植体培养。

 

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