金正日球根海棠叶片组织培养诱导的研究

2.1 激素组合对愈伤组织形成的影响

取经无菌处理的外植体在无菌条件下， 分别接种在准备好的 Al ～A 8培养基上， 培养基 p H  5.8 ， 琼脂 8 g · L^-1 ， 蔗 糖 3 0 g· L^-1  。培 养 条件： 培 养 温 度

( 2 0 ±2 ) ℃， 光强 12 0 0 l x ， 每天 1 0 ~1 2 h光照， 4周后观察愈伤组织形成情况。
经实验分析： 在 Ms 培养基上由于激素种类及含量的不 同， 愈伤组织形成 有差异。总趋势 附加 6 - B A、N A A或 2 ， 4 - D的各 组分 均形成愈伤 组织， 诱导 率

100% ～8 0%   ； 随着 NAA的减少 ， 愈伤组织的体积生长变慢， 2 ， 4 - D   0.5   mg· L^-1 对愈伤组织的形成作用比较大， 6 - B A 0.5   mg· L ^-1 的浓度对愈伤组织形成作用 比较大。在 A1 、 A 2培养基由于激素 NAA含量过高， 愈伤组织形成迅速， 但呈薄片，疏松。A3培养 由于激素NAA含量减少， 愈伤组织生长紧密， 颜色浅绿， 突起，粗厚。A4没有激素 NAA， 而添加激素 2 ， 4 -D  0.5   mg·L  形成淡绿色的愈伤组织， 有突起。A5培养基 6 一 B A含量减少为 1.0   m· L ～， 也没有激素 NAA， 取而代之的是 2 ， 4 - D   0.5   m g · L ^-1   ， 形成淡绿色的愈伤组织， 紧实、 健壮。从试验情况可以总结出： A3 、 A4 、 A5 、 A6培养基都有利于愈伤组织形成， 且能达到粗厚健壮。也就是 适宜激 素含量 范 围为 6 - B A  2 ～1mg· L^-1  和 NNA0.5 ～ 0.1   mg． L^-1 。    
2.2 激素含量对不定芽分化影响
40d 后观察含有不同浓度的外源激素6 一BA 的培养基对愈伤组织形成和芽分化（见表2 ) ，从试验情况可以看出激素种类、含量对不定芽分化有重要影响。A1 组织死亡是由于6 一BA 、NAA 用量过高，A2 形成愈伤组织后不进行分化生长是由于6-BA 用量高造成的，A3 由于6 一BA 浓度高形成愈伤组织后再分化形成芽，生长时间长。A4 由于2 , 4 一D 的加人形成愈伤组织再发芽因而生长缓慢，6 一BA 高浓度使芽分裂多而细，A7 生长素不足而影响生长田。从苗的质量上看A5 和A6 都可以作为建立无性系的培养基，但从培养的时间上看A6 是最适宜的，A4 和A7 形成的芽细弱，从研究结果可以看出1mg· L^-1的6 一BA 即能满足愈伤组织不定芽的分化。从实验可以看出诱导再分化的最佳激素组合是：A6 培养基MS + 6 一BA1.0 + NAAO.5 。
3 结论与讨论
在不同激素组合对愈伤组织形成的实验中，我们配制了的8 种不同激素组合和不同浓度激素的培养基，其中A3 培养基MS + 6 一BA2.O + NAA 0.1 , A4 培养基MS + 6 一BA2.O 十2 , 4 一印D0．5 , A5 培养基MS + 6 一BA1.O 十2 , 4 一D0.5 、A6 培养基MS 十6 一BA1.O 十NAAO.5 有利于愈伤组织形成，配比组合均有利于球根海棠的脱分化即由外植体形成愈伤组织。经实验筛选出最适合诱导愈伤组织的培养基是MS + 6 一BA1.0~2.0十NAAO.1 ~0.5 。在愈伤组织的保持与不定芽的分化的比较实验中，A6 培养基MS + 6 一BA1.0＋NAAO.5 有利于愈伤组织的形成和增殖，有利于球根海棠愈伤组织的再分化。

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