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合果芋组织培养快繁技术研究一

录入时间:2009-6-26 9:54:04 来源：青岛海博

摘要：以合果芋幼嫩侧芽为外植体，研究了不同激素浓度对合果芋组织培养的影响。结果表明：用0.1 ％的氯化汞溶液＋3 滴Tween20 对外植体处理35 min ，灭菌效成功率达75 % ；较好的诱导培养基为MS 十BA 5.0mg/L 十IAA 0.2mg/L ，最佳的增殖培养基为BA 2.0mg/L 十NAA 0.1mg/L ，最好的生根培养基为MS 十NAA 0.3mg/L + IAA 0.2mg/L ；生根瓶苗置于室外自然光线下练苗7d 后，移栽到珍珠岩：腐殖土：壤土＝1 ： 1 ： l 的基质中，成活率可达94 ％以上。
关键词：合果芋；组织培养；快繁；培养基
合果芋，又名箭叶芋，为天南星科多年生常绿攀缘草本植物，原产于中南美洲热带地区，全世界广泛栽培，我国南方各省种植十分普遍。它除了广泛应用于室内盆栽观赏外，还可设立成绿色支柱造型，更多用于室外半阴处作地被覆盖，是一个极具发展潜力的观叶植物。
合果芋的常规繁殖方法为扦插或分株，分株繁殖通常在秋季至冬季。但繁殖系数较低，质量较差，整齐度低，成本较高，而且受季节的影响，种苗满足不了市场的需求。为此，探索一条规模化快繁技术十分必要，有关合果芋的组织培养研究国内已有报道，但系统研究较少。试验以合果芋的侧芽为外植体，研究不同浓度BA 、NAA 和IAA 对不定芽诱导和生根的影响，探讨适合合果芋离体快繁的最佳激素组合，并建立组培快繁的技术体系，为合果芋新品种选育和优质种苗工厂化生产提供技术支持与储备。
1 材料和方法
1.1 供试材料
取云南省农科院花卉所内la 生无病虫害优选单株的幼嫩侧芽60 个作为外植体，品种为‘金童子’。
1.2 试验方法
1.2.1 外植体的处理与消毒将采回的外植体去除老叶部分，采集的侧芽由生物学基部至上约1cm 处以手术刀切断，此段即为需接种的外植体部分。将外植体用洗衣粉水清洗2 ~3 次，洗时用手轻轻揉搓，洗后以清水冲净。用75 ％的酒精溶液外植体表面消毒1 min ，用无菌水冲洗1 遍。将外植体平均分为3 个处理，每个处理20 个芽，用0.1 ％的氯化汞溶液＋3 滴Tween20 对外植体分别按35 、30 、25 min 的时间段进行灭菌后，以无菌水冲洗2 次人超净台。然后用0.2 ％氯化钠溶液2ml＋3 滴Tween20 分别对各外植体进行灭菌处理25 min ，后用无菌水冲洗2 次。将处理后的外植体分别接人MS 十BA 1 + IAA 0.2 普通草本花卉常用的诱导培养基中，每组20 瓶，为防止灭菌后的交叉污染，每瓶接人1 芽，7d 后观察结果，而后转人诱导培养基中。
1.2.2 诱导和增殖培养
不同诱导培养基的处理：将灭菌成功后的外植体平均分为3 组，分别接人加有① BA 10 + IAA 0.2 ，② BA5 十IAA 0.2 ，③ BAI + IAA 0.2 的MS 诱导培养基中，方法参照熊丽等编写的专著图。每组10 瓶，每瓶为1 次重复。每瓶接人1 芽，封口膜采用不透气膜。以培养基失水时间来决定，30d 为1 个培养周期，第2 个周期取出切分后，继续用上述3 种培养基分别进行诱导，3 个周期后观察诱导出的不定芽总数及其生长情况，筛选合适的诱导培养基主成分，并在后续的培养中加以应用。不同增殖培养基的处理：配制MS 为基本培养基的3 组不同激素浓度：① BA5 十NAA 0.1 、② BAZ + NAA 0.1 、③ BAI + NAA 0.1 的增殖培养基，每组10 瓶，将诱导出的丛生芽在超净工作台上切分为0.5 cm² 左右的小块，并将切分后的小块分别接人以上3 组培养基中，每瓶6 块，每瓶为1 次重复，l 个周期后观察增殖培养后产生不定芽的总数和和平均高度，计算繁殖系数，筛选最佳的增殖培养基激素浓度组合。1.2.3 生根培养增殖培养2 个周期后，从增殖出的不定芽中切出长约1.ocln 左右单株粗壮幼苗分别接入不同激素浓度：① NAA 0.1 、② NAA 0.5 、③ NAA 0.1 + IAAo.1 、④ NAA 0.3 十IAAO.2 的生根培养基中，每组10 瓶，每瓶10 株，每瓶为1 次重复，1 个周期后观察生根培养效果，统计总生根苗数、开始生根的天数、生根量和生根率，筛选最佳的生根培养基激素浓度组合。
1.2.4 过渡移栽
当生根培养基数达到一定数量时，选取已长出1cm 根毛的生根苗20 瓶，要求每瓶生根苗数不低于20 株。将它们置于室外光线下闭瓶培养，7d 后取生根苗150 株，洗掉小苗根部的培养基，去掉基部发黄叶片，栽人灭过菌的基质中（设计3 组基质：① 净腐殖土；② 腐殖土十珍珠岩3 : 1 ；③ 净珍珠岩），浇透水后以薄膜覆盖，湿度控制在90 ％以上，每周浇1 次1 / 2MS营养液。进行室外过渡试验，每组基质过渡苗50 株，单株重复，采用相同的水肥管理方法，30d 后观察统计各处理成活率、平均株高和根长，以筛选最佳的过渡方式和基质。
1.3 培养条件
室内培养条件光照时间10 一12h ，光照强度2000lx ，培养温度20~ 25℃ ，培养基含糖30 % ，琼脂7g/L , pH 5.8 。室外培养条件为光照时间12h ，光照强度4 000 一10 000 lx ，温度12 一25℃。

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