核桃组织培养技术综述一

摘要：分别对核桃和山核桃属植物的组织培养中外植体选择与消毒、外植体褐化问题、外植体的主要诱导技术及外植体成苗以后生根技术研究等进行综述，展望其发展前景．
关键词：核桃；组织培养；外植体；褐化；展望

核桃是核桃和山核桃的总称，核桃生产指的也是核桃和山核桃的生产。核桃作为世界四大干果之一，富含各种营养成分，以其很高的经济、生态及社会效益而广泛栽培。
核桃实生繁殖易产生变异，扦插繁殖又难以生根，嫁接繁殖也因接口处易发生褐变而导致成活率较低。核桃繁殖技术直接制约着良种普及，20 世纪60 年代我国大力开展该项技术研究，研究内容不断深入，方法不断改进。核桃组织培养、嫁接、扦插等无性繁殖技术是近来核桃研究的热点。尤其是核桃组织培养技术，繁殖系数高，速度快，可缩短育种时间，节省人力物力，提供大量苗木，并对核桃良种化、区域化、产业化具有重要意义。
1 核桃组织培养技术研究进展
1.1 外植体选择与消毒核桃组织培养中外植体选择是重要环节，其选择部位直接影响到组织培养工作的成败。PonchiG 研究证实，组培时最适宜的外植体为旺盛生长的新梢。黑核桃建立无菌外植体系统时，采当年的硬枝，在温室内培养长出嫩枝，再用嫩枝培养，取得了较好效果”，。国外学者在MS 培养基上培养核桃分生组织、茎尖、顶芽时发现：2 弓mm 长的茎尖、带1 一2 个顶芽的茎段为最适培养材料，分生组织不适合于作培养材料川。外植体消毒既要求将外植体表面微生物彻底杀死，又要求尽可能少伤害外植体组织和表层细胞141 。李颖等利用青霉素和多菌灵来控制污染，多菌灵能有效地杀灭真菌，而青霉素在初代培养时只能起抑制细菌作用。傅玉兰等试验得出了美国山核桃的最佳灭菌方法：外植体在70 ％酒精中浸30s ，再将其用0.2 ％升汞液（加数滴吐温80 ）浸15 min ，无菌水冲洗10 次，最后接种。培养基中添加适量活性炭，前期暗培养。

1.2 外植体褐化问题
褐化是指外植体在诱导脱分化或再分化过程中，自身组织从表面向培养基释放褐色物质，以至培养基逐渐变成褐色，外植体也随之进一步变褐而死亡的现象。
1.2.1 褐化的原因
核桃组织中的酚类物质含量较高。酚类糖昔化合物是木质素、单宁和色素的合成前体。因此，当酚类化合物含量高时，木质素、单宁或色素形成就多，导致褐变的发生。
1.2.2 褐化的防治
褐变现象能否得到有效控制，是核桃组培能否成功的关键所在，因此研究者们为此做了大量的研究工作。徐振彪等人通过实验提出了自己的观点：控制光照、温度、选择适宜培养基及外植体、调整培养基内的激素浓度、比例及附加成份，不同培养方式或加入氧化性物质可以对褐化现象起到一定的抑制作用，但这些方法各有利弊。采用1 / 2 MS + 2g 活性碳培养基，先将其置于5℃冰箱内暗培养1 周后取出，再转接于DKW + 6-BA 1.0 mg / L + IAA 0.01 mg / L 培养基中，可减轻褐变。通过添加抗氧化剂、抑制剂、吸附剂表明，培养基中添加5 mL20%硫代硫酸钠能有效地抑制褐化且不影响植株生长。黑暗处理有利于抑制褐变，适宜时间为7d 左右。培养基中加入抗氧化剂和蛋自质、氨基酸、多胺、亚硫酸氢钠等PPO 活性抑制剂来防止褐变的发生，以及改善组培苗生长的培养基、培养瓶、培养室环境等措施都可以有效地防止褐变发生。

上一篇：泥胡菜的组织培养及高效无性系建立的研究二

下一篇：核桃组织培养技术综述二