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口蹄疫病毒理化学特性



录入时间:2009-6-30 10:48:05 来源:青岛海博

理化学特性 口蹄疫病毒的结 构和成分都较简单。成熟病毒粒子约含30%的RNA,其余70%为蛋白质。口蹄疫病毒的RNA呈 单股线状,为约由8 500个核苷酸组成的正链RNA,具有感染性,分子量约26~28×10 6 D a,其碱基组成为A/G/U/C=26/24/22/28。口蹄疫病毒的完整粒子(146S)的衣壳由1A(VP4 )、1B(VP2)、1C(VP3)和1D(VP1)四种结构蛋白各60个分子组成。装配过程中的前衣 壳(75S)和14S颗粒均由1AB(VP0)、1C和1D三种蛋白构成。但前衣壳各蛋白均为60个分子, 而14S颗粒中只各含5个分子。口蹄疫病毒粒子裂解时产生的12S蛋白亚单位由1A、1C和1D三 种蛋白各5个分子组成。1个蛋白亚单位构成病毒粒子二十面体的一个面。用酸处理口蹄疫病 毒,可使每个病毒粒子释出20个蛋白亚单位。VP4与RNA紧密结合,是病毒粒子的 内部成分。在以超速离心技术制备的病毒制品中,可以见到不同大小的几种粒子。最大的 颗粒为完整病毒,直径25nm,沉淀系数为146S,在氯化铯中的浮密度为143g/ml,分子量 为 808×106 Da。稍小的一种颗粒为空衣壳。空衣壳的直径为21nm,沉淀系数为75S,分子 量 为47×106 Da。在氯化铯中的浮密度为131g/ml。空衣壳不含RNA,所以没有感染性。 最 小的一种颗粒为衣壳蛋白亚单位,其直径是7nm,沉淀系数为12~14S,在氯化铯中的浮密 度为15g/ml,分子量为38×106 Da。应用尿素和十二烷基硫酸钠(SDS)于高温下使病 毒 粒子裂解,即可获得大量的12S衣壳蛋白亚单位。如上述,酸处理也可使口蹄疫病毒释出12S 蛋白亚单位(由VP1、VP2和VP3构成)、RNA和VP4。以福尔马林或乙酰乙烯亚胺灭 活的完整病毒粒子或者空衣壳,在给动物接种后,可以使其产生补体结合、沉淀和中和抗体 ,但12S衣壳亚单位仅能产生补体结合和沉淀性抗体,几乎不能使动物形成中和抗体。给已 注射完整病毒、空衣壳或12S衣壳亚单位的动物分别攻击强毒力的口蹄疫病毒,也呈同样结 果:完整病毒和空衣壳引起较好的免疫保护力,而12S衣壳亚单位注射组动物几乎没有任何 免疫保护力。
 应用聚丙烯酰胺凝胶电泳分离VP 1、VP2和VP3,加入福氏不完全佐剂后注射豚鼠,仅VP1产生对病毒粒 子的沉淀反应抗体,并能引起部分的免疫保护力。在VP1、VP2、VP3和VP4等4种蛋白 质中,与中和抗体以及抗感染有关的主要是VP1,但只完整病毒粒子和空衣壳有良好免疫原 性,因此VP1可能必须有VP4共存或存在佐剂时才能发挥免疫原性,而且与VP1本身的立 体构型有关。此外,在病毒增殖的动物机体内和感染细胞培养液中还可发现一种非结构性 的病毒特异蛋白质,称为“病毒感染相关成分”或VIA抗原。因为在注射灭活疫苗的动物体内 不能检 出VIA抗原及其抗体,因此VIA抗原的出现是动物感染口蹄疫,亦即已在体内发生病毒增殖的证 据。VIA抗原其实就是依赖RNA的RNA聚合酶。VIA抗原在琼脂扩散试验中对各型口蹄疫病毒的 抗体都呈现反应。口蹄疫病毒的血凝特性尚未充分证实。

 

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