细叶石斛原球茎组培褐化抑制与试管苗生根二

从上述的实验结果可以看出，除了④ 编号培养基中的原球茎死亡之外，其他编号培养基中的原球茎都有一定的褐化现象，其中加活性炭的原球茎褐化程度最低，褐化率只有11.25 % ，与对照组的褐化率37.52 ％相比有一定的抑制作用。而附加聚乙烯毗咯烷酮的原球茎褐化程度最大，褐化率达到80.02 % , 加速了原球茎的褐化。附加维生素C 的原球茎的褐化率为33.41 % ，介于附加活性炭和对照组之间，说明附加维生素C 有一定的抑制作用，但效果没有附加活性炭的好。调pH 为5.3 的培养基的原球茎在培养了17d 后已经完全死亡，可能是由于培养基不凝，水分过多，抑制了原球茎呼吸从而导致死亡。从上述结果看，附加活性炭的原球茎生长最好，褐化率最低（见图1 ) ；加维生素C 的效果次之，加聚乙烯毗咯烷酮反而加速原球茎的褐化。
2.2 适宜的生根基本培养基筛选
接种完成后，每隔1 天进行一次实验观察，记录不同的基本培养基开始生根的时间及其他的现象。从表2 中可以看出，WPM 、大量元素减半的MS 、MS 、B5 基本培养基中的植株开始生根所需的时间相差不大，其中WPM 培养基的植株生根所需时间为19d ，是所需时间最少的，同时植株较壮，叶色浓绿，平均根数5.8 根／株，较粗壮（见图2 ) ；其次为大量元素减半的MS 培养基中的植株，所需时间为20d ，植株较壮，叶色绿，平均根数5.6 根／株；再次为MS 培养基中的植株，所需时间为22d ；表现较差的是B5 、N6 培养基。

2.3 生长调节剂的筛选
接种4Od 后，进行数据统计，本次试验以生根率为主要分析结果。进行直观分析和方差分析，结果见表3 。从表3 可直观看出，A 因素的2 水平、B 因素的2 水平和C 因素的l 水平对生根率的影响较大。由此可知细叶石斛的生根培养基的优良配方为MS + A2B2C1。因素的主次由极差的大小来衡量，极差大表明此因素对生根率的影响大，即此因素比较重要；极差小表明此因素对生根率影响小，即此因素是次要的。从表3 可知，主要因素为A ，其次为B ，再次为C 。方差分析结果表明，A 因素达到极显著水平（P=0.0001 < 0.01 ) ; B 因素达到显著水平（P=0.03 < 0.05 ) ; C 因素差异不显著（P＝0.195 > 0.05 ）。这说明方差分析的结果与直观分析的结果一致。
在这一系列的培养基中的植株开始生根的时间大致相同，都在接种20 一23d 左右，但是一旦开始生根，根伸长的速度很快。生根10d 后（即接种后30 - 33d ）根长就达到3 cm 左右，到接种35d 后，根伸长的速度开始下降，接种后40d 时基本停止伸长。这时候苗的质量最好：苗粗壮、叶色浓绿、根吸收营养的能力强。培养时间超过50d ，培养基的营养几乎都耗尽，植株开始变黄，表现出营养不良的状况，培养基也开始变为褐色。所以如果要炼苗移栽，建议在接种后40d左右开始炼苗，效果会相对比较好。

3 结论
在培养基中添加活性炭对细叶石斛的原球茎褐化抑制的效果比较好，但是仍然不能完全抑制原球茎的褐化，怎么才能完全抑制细叶石斛原球茎增殖过程中的褐化现象，仍需要进一步的研究。实验结果表明WPM 培养基作为基本培养基比较适合细叶石斛的生根，所需时间最少，生根数量较多，植株粗壮，其次为大量元素减半的MS 培养基。正交实验初步表明生长调节剂中IBA 对细叶石斛试管苗生根的影响达到极显著水平，NAA 达到显著水平，而6 -BA 对细叶石斛的生根没有显著影响。该实验筛选出较好的生长调节剂组合及浓度水平，为细叶石斛的生产推广打下基础。

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