正交试验优化菊花组织培养条件一
录入时间:2009-6-30 14:20:44
来源：青岛海博
摘要：通过菊花无菌苗体系建立、愈伤组织诱导、不定芽分化、不定根诱导试验，发现用0.2 % HgCl2对叶片、茎尖消毒3 - 4 min 建立无菌苗体系较好；2 , 4 一D 0.5mg/L 、6 一BA 0.5mg/L 对愈伤组织的诱导较好；生长素NAA 0.lmg/L 、IBA 0.1 mg/L 、2 , 4 一D 0.lmg/L 和细胞分裂素6 一BA 1.0mg/L 、ZET 1.0mg/L、2 一ip 1.Omg/L 对不定芽分化形成均有较好效果。
关键词：菊花；组织培养；正交试验；激素
菊花为菊科多年生草本植物，具有观赏及药用价值。菊花喜凉爽、较耐寒，生长适温18 一21 ℃，在微酸性至微碱性土壤中皆能生长，以pH 值6.2 一6.7 最好川。菊花味甘、苦，微寒。归肺、肝经川。花和全草含挥发油，成分有菊油环酮、蜡状物、单龙脑酞酸酷、菊醇利黄酮类成分、木裤草素一7 一葡萄糖昔二水合物等［51 。具有散风清热、平肝明目之功效，可用于风热感冒、头痛眩晕、目赤肿痛、眼目昏花的治疗。本试验的目的旨在通过正交试验优化菊花组织培养的条件。
材料与方法
1.1 材料
菊花采自楚雄师范学院校园，4 个品种代号分别为品种l 、品种2 、品种3 、品种4 。
1.2 方法
采用正交试验设计，结果用SPss 11.5 软件进行统计分析。
1.2.1 不同外植体部位、不同消毒时间对菊花无菌苗体系建立的影响试验采用1/2MS 。为基本培养基，选取菊花茎尖、叶片、根，用0.2 % Hgcl2 分别处理3 min 、4 min 、5 min, 进行单因素多水平对照试验。每组试验接5 瓶，每瓶接种4 个材料，暗处理7d 后观察。
1.2.2 不同外植体部位、基本培养基类型及激素组合对菊花愈伤组织诱导的影响试验采用5 因素4 水平正交试验，每组试验接5 瓶，每瓶接种4 个材料。因素水平见表1 。
1.2.3 不同来源的愈伤组织、基本培养基类型及激素组合、蔗糖浓度对诱导菊花愈伤组织分化形成不定芽的影响试验采用5 因素4 水平正交试验，每组试验接5 瓶，每瓶接种4 个材料。因素水平见表2 。
2 结果与分析
2.1 不同外植体部位、不同消毒时间对菊花无菌苗体系建立的影响
方差分析结果表明，消毒时间、外植体部位对成活率的影响分别为极显著（P=0.001 < 0.01 ）和显著（P=0.028 < 0.05 ）。多重比较结果（表3 ）表明，消毒3 min 或4 min 的成活率极显著优于5 min ；消毒3 min 或4 min 对成活率的影响不显著，均具有较好的消毒效果。外植体水平l （叶片）、3 （根）对成活率的影响差异不显著，且均极显著优于水平2 （茎尖），因此叶片、根在菊花无菌苗体系建立中均可以使用。
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