耐盐芦笋的组培快繁技术研究一
录入时间:2009-7-2 10:47:15
来源：青岛海博
摘要：东营市农业科学研究所立足于黄河三角洲实情，以新萌发的芦笋嫩茎为试材，研究不同激素组合对诱导芦笋茎段愈伤组织的影响、对细胞胚的影响试验及对细胞胚的优化诱导试验，培育出2 个耐盐能力强、产量高、品质优，适合广大盐碱地区种植的耐盐芦笋系号，开发前景极好。
关键词：芦笋；组织培养；快速繁殖；盐碱地
芦笋又名石刁柏，是百合科天门冬属植物，其嫩茎是人们喜食的蔬菜，营养价值高，并具防癌、抗癌作用，国际市场畅销不衰，是高效创汇作物。东营市农业科学研究所立足于黄河三角洲实际，培育出2 个耐盐能力强、产量高、品质优，适合广大盐碱地区种植的系号，开发前景极好，为了加速其推广繁殖，并为进一步深化育种进行技术储备，对耐盐芦笋的组培快繁技术进行了研究，试验取得了成功。
1 材料与方法
1.1 试验材料
3 一5 月份取新萌发的耐盐芦笋嫩茎。
1.2 外植体处理
嫩茎剪回后，先用自来水冲洗2~3 遍，再取1 一1.5 cm 长的茎尖，4 min 之后，用无菌水漂洗4 一5 次，最后用无菌滤纸吸干水分。
在超净工作台上用75 ％的酒精浸20s，再于0.1 % 的HgCl2 溶液中消毒，消毒后的芦笋外植体在接种前还须用无菌剪刀剪去旧切口，创造一个新切口，以利于脱分化过程中养分的吸收。
2 脱分化试验
2.1 培养条件
温度（27 士2 ）℃ ，光照强度1 800lx ，光照时间每天12h ，MS培养基十蔗糖（30g/L) ＋活性炭（0.5 mg/L ) + 激素，培养基的灭菌：121℃，0.1 一0.14kP 下17 min 高压灭菌。
2.2 试验设计
如表1 ，将处理好的芦笋外植体接种于表l 所列培养基中，观察愈伤组织生长情况，接种10d 后，茎段均能轻度膨大，15d 后除Ll 外均能产生少量愈伤组织，25d 后，除L1 外均能产生较多愈伤组织，但L7 、L8的愈伤组织有轻度的水渍状，也略显松散，L3 、L4形成的愈伤组织质量较好。
3 体细胞胚的诱导及增殖
3.1 体细胞胚的诱导
由于在愈伤组织分化成丛生芽的过程中，丛生芽的形成不仅取决于激素的浓度，还取决于2 种激素的相对比例，芦笋愈伤组织体细胞的诱导，以MS 为基本培养基，蔗糖30 mg/L ，活性炭0.5g/L ，取细胞分裂素BA浓度为0.5 、1.0 、1.5 、2.0 mg/L，生长素NAA 浓度为0.0 、0．4 、0．8 、1.2mg / L ，安排试验，选取培养好的愈伤组织移植于上述方案配置的培养基中，观察丛生芽分化情况。
愈伤组织接种10d 后，开始出现浅绿色瘤状突起，20d 后逐渐伸长产生丛生芽，但是不同的激素浓度及配比的分化率和丛生芽数不同。从表2 可以着出，分化率和丛生芽数较高的试验分别为10 号和14 号，由于分化率还不够理想，又围绕10 号和14 号对激素浓度进行了调整（见表3 ）。结果表明，适宜芦笋愈伤组织分化成芽的激素浓度分别为BA：1.8mg／L , NAA ：0.2mg / L ，因此可以认定MS + BA 1.8 mg / L 十NAA 0.2mg / L 十糖30g/L十琼脂5.8g/L＋活性炭0.5g/L，是芦笋最佳分化培养基。
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