用灵发素（LFS ）建立翅子罗汉果组织培养技术一

录入时间:2009-7-2 11:53:03 来源：青岛海博

摘要：目的：建立翅子罗汉果的组织培养技术；方法：以翅子罗汉果野生植株的单节茎段作外植体，Ms 为塞本培养基，在统一添加NAA0.1 后，再分别添加LFS , BA , KT0.3 进行诱导；结果：( 1 ）只有Ms + NAA0.l + us0.3 能诱导腋芽萌发并建成根苗齐全的再生植株，25d 萌发率）90 % ；其它培养基只诱导外植体形成大量愈伤组织，腋芽不萌发；( 2 ）用Ms + LFS0.3 进行继代培养，周期25~ 30d ，增殖倍数3.7 ; ( 3 ）再生植株移栽成活率90 % ~100 ％。结论：在常用的CTKs 中，至今仅发现LFS能够诱导翅子罗汉果单节茎段获得再生植株。
关键词：灵发素；翅子罗汉果；濒危珍稀植物；组织培养；再生植株
LFS是一种微生物来源的新型植物生长调节剂，呈白色针状结晶，分子式C₁₁H₁₃ O₄N₅。其突出特点是，同时具有细胞分裂素和生长素（Auxin ，如蔡乙酸NAA ，叫噪乙酸IAA 及叫噪丁酸IBA 等）的生物活性。因此，它不仅能诱导和促进地上茎、叶器官的分化与生长，也能诱导和促进地下根器官的分化与生长。而常用CTK ( BA , KT 和ZT 等）则被学术界公认为，都显著抑制不定根的形成。加之LFS易溶于水，高温高压灭菌条件下稳定川，所以很适宜在植物组织培养技术中应用，并且已经获得了一批颇有价值的成果。翅子罗汉果与目前大量栽培的普通罗汉果同为罗汉果属，但属于不同种。
据钟仕强介绍，翅子罗汉果具有抗病、抗高温能力强、生长旺盛、果大而多等优良性状，其总糖含量达28 ％左右，亦高于普通罗汉果的26 ％左右。特别值得指出的是，普通罗汉果甜贰的甜度是蔗糖的300 倍左右，就已经引起了国内外的广泛关注，然而中国科学院的研究工作者在翅子罗汉果中发现的另一种甜味贰，命名为翅子罗汉果贰I ，其甜度竟达到蔗糖的560 多倍，因此成为世界上最甜的葫芦烷甜味剂，开发前景十分诱人。翅子罗汉果1871 年被人们发现至今已有130 多年，1914 年作为新种正式记载也有90 多年。但是，目前其野生资源几乎灭绝，非常难觅。虽然关于普通罗汉果的组培技术已有不少研究，却鲜见翅子罗汉果组培技术的报道。为保护这一濒危而珍贵的植物种质资源，以便日后的研究和开发利用，自20 （玛年开始对翅子罗汉果组培技术进行探索，历经多次失败之后，最终用LFS成功获得再生植株，建立了相应的组织培养技术。
1 材料与方法
1.1 材料
野生翅子罗汉果植株由广西药用植物园钟仕强主任中药师采自广西大新县山林，移栽于广西大学农业教学科研基地防虫网室。取其新生藤蔓用报纸包裹，外套塑料保鲜袋减少失水。实验室内用自来水冲洗30 min 以上。剪除顶芽和叶片，保留部分叶柄，再剪成单节茎段（长2 一3 cm ) ，备用。
所用LFS，BA , KT 和NAA，等生长调节剂的来源，见文献。
1.2 方法
1.2.1 培养基配制
外植体诱导培养基：为便于直接对比，在拟定外植体诱导培养基配方时，参考了许鸿源和刘晓燕仁的配方，将3 种细胞分裂素LFS , BA 和KT 的使用浓度都调整为0.3mg/L ，而NAA 保持0.1mg/L 不变：( l ) MS ( ck ) ; ( 2 ) MS + NAA 0.1 ( mg/L ，下同）+ LFS0.3 ; ( 3 ) MS + NAA 0.1 + BA 0.3 ; ( 4 ) MS + NAA 0.1 + KT 0.3 。
继代与生根培养基：根据本实验外植体诱导的结果和许鸿源等的经验，定为（5 ) MS + LFS0.3 。上述各组培养基均添加蔗糖3 % ，琼脂4.5 g/L , 调pH 至5.8 。

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