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南姜组培快繁技术研究一

录入时间:2009-7-6 15:17:08 来源：青岛海博

摘要：对具有药用与调味价值的植物南姜进行了组培快繁技术的研究。结果表明：南姜块茎的幼芽是理想的外植体；消毒方式选用75 ％乙醇30s + 0.1 % HgCl2处理10~15 min ，污染率可降低至12 % ，成活率可达64 % ; MS + 3 mg/L 6-BA 十0.5 mg/L NAA 激素配比有利于诱导芽分化及腋芽的萌发，其诱导率可达83.3 % ；生根培养基采用1 / 2 MS ＋0.1mg／L NAA + 0.05mg / L 6-BA ，其生根率达100 % ，平均生根数12 一15 条。
关键词：南姜；组织培养；快繁
南姜也称红豆蔻、大高良姜，为姜科多年生草本植物。在亚洲热带地区广布，广东、台湾、广西、湖南和云南等省区也有分布。其果实与根茎可供药用，自中世纪以来，南姜就用作药材与辛香调料使用，如今，中国依然是食用南姜的主要国家之一以。近年研究发现其根茎中含有多种芳香油、类黄酮、矿物质、酪类等物质川，对肌肤具有振奋、活化与抗自由基等多重特性，因此南姜也具有美容效果的巨大商业价值。
目前，南姜只是作为一些中药配伍以及地方风味小吃的调味品，我国对它的研究与开发相对滞后，它的价值还未得到开发与应用。南姜种植范围小，品种质量良落不齐，这严重制约着南姜的生产与推广。为了提高南姜的利用价值，就必须加强南姜优良种质的培育研究，同时也能顺应绿色食品工程和中药事业的发展。组培快繁技术是培育优良种质资源和提供大量优质种苗的有利手段，因此，南姜组培快繁技术的研究势在必行。
1 材料与方法
1.1 材料
将供试南姜根状块茎冲洗干净后，覆盖于洗净的河沙中，置于（25 士3 )℃ 通风处催芽培养。生长成幼株后，分别取其幼芽、嫩叶、茎、根等作为组织培养的外植体。将获取的材料置于低浓度的肥皂水中浸饱约30 min ，清水冲洗干净，晾干。放人已灭菌的三角瓶中，分别采用不同浓度的次氯酸钠、HgCl2、乙醇单独或相配合的消毒方法处理。
1.2 培养基
选用MS 基本培养基，在培养的不同阶段分别添加不同种类的植物激素，在蔗糖30g/L 、7 g/L 的琼脂中固化，pH 5.8 ，经配制分装后于121 ℃ （1.1 kg /CM²）条件下灭菌20 min ，备用。
1.3 方法
1.3.1 不同部位外植体的诱导效果分别取南姜幼株上的刚萌动的幼芽、嫩叶、茎、幼根等作为组织培养的外植体，分别接种在愈伤组织诱导培养基和芽增殖培养基上，观察不同部位外植体的诱导效果。1.3.2 愈伤组织的诱导将经过消毒后的外植体接种在已灭菌好的诱导愈伤组织培养基上。培养基中的激素成分配比为：0.05 mg / L6-BA + 1 、3 、5 、8 mg/L 2 , 4 一D , 0.1 mg/L6-BA + 1 、8 Mg/L 2.4 一D , 0.05 mg/L6-BA 十5 mg/L NAA 。
1.3.3 芽增殖的诱导在0.5 mg/L NAA 的培养基上，设定了、l 、3 、5 、8 、10mg / L 5 个不同6-BA 浓度作为试验处理，研究了南姜芽增殖的诱导。
1.3.4 对已发芽的外植体生根诱导外植体诱导出芽后，将其接种到加人不同配比激素的1 / 2 MS 培养基上，观察其对根诱导的结果。

2 结果与分析
2.1 南姜无菌系建立的选择
南姜生长于地下，根状块茎作为外植体携带有大量微生物，建立组织培养的无菌体系有一定的难度。如何成功的对生长地下的植物外植体进行消毒处理，是建立无菌培养的前提田。该试验从外植体的消毒处理人手，研究了不同消毒方式对外植体生长情况的影响。表1 的研究结果显示，单独使用过高浓度的HgCl2及长时间的HgCl2处理虽然杀菌效果好，但是对植物体的损伤也较大，从而降低了外植体的成活率。使用NaClO 作为消毒剂则容易使外植体产生褐变，且杀菌效果也较差。所以，对于南姜的外植体的消毒处理，应选择75 ％乙醇短时间处理，再使用较低浓度的HgCl2 ( 0.1 % ）处理10 一15min ，这样的处理方式可以最大限度的降低污染率，减少对外植体的损伤，提高其成活率。此外，消毒过程中滴加适量的吐温作为表面活性剂，并不断的振荡摇晃，可增加消毒效果。

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