南姜组培快繁技术研究二

2.4 不同外植体的分生芽的诱导效果将南姜幼株的幼芽、嫩叶、幼根等不同部位作为外植体分别接种到MS + 3mg / L6-BA ＋0.5mg / L NAA 诱导分生芽培养基上，经过30d 的培养，结果见表3 。可以看出利用叶芽切片诱导分生芽具有很好的效果，每个叶芽片均能长出2 一3 个幼芽。而利用嫩叶和幼根作为外植体时，难以诱导出分生芽。应当选择幼芽作为诱导分生芽外植体。
2.5 不同激素配比对南姜诱导芽分化效果分生芽的诱导同外源激素的添加有着很重要的关系明。将南姜茎尖幼芽切片接种于含有不同激素组合的MS 培养基中，经过25d 的培养，观察结果见表4 。表4 试验结果显示，采用的几组激素配比的培养基均能诱导幼芽切片长出幼芽，并且幼芽的长势良好，活力较强。其中0.5mg/L NAA + 3 mg / L6-BA诱导分生芽萌发的效果最好，其诱导率高达83.3 %，有助于南姜组培快繁。
2.6 不同激素诱导生根效果
将已长出分生芽的组织接种到含有不同激素的1 / 2 MS 培养基中，经过30d 的培养，观察到的生根效果见表5 。在试验采用的几组培养基中南姜幼芽均能生根。在无激素刺激的情况下，生根较慢，长出的根短细，植株长势差，有褪绿、白化、干枯的趋势。0.1mg／L NAA + 0.05 mg/L 6-BA 下，根系生长快，根粗壮、发达，侧生根生长密集，植株叶色浓绿，长势良好0.5mg / L NAA + 1mg/L IBA处理下，根较细短，侧生根相对稀疏，植株整体长势一般。从诱导的根数及植株的生长情况看，选择0.1 mg/L NAA + 0.05 mg/L6-BA 的1 / 2MS 培养基来作为生根培养基，具有较好的效果。

2.7 试管苗的移栽
移栽是组培快繁过程中最后一个环节，也是一个非常关键的环节。试管苗在试管中无论生长多好，移栽若不成功的话，也会导致试验前功尽弃。当试管苗具4 一5 片叶子，7 一8 条根时，即可移栽。移栽前，先将培养瓶移出培养室，置于通风明亮的常温环境下练苗3 一4d ，期间每天打开瓶盖2 一3h 。接着从瓶中取出试管苗，用清水洗净粘附于根系上的琼脂。移栽于灭菌的陶土基质中，淋足定根水，再用已打孔透气的薄膜覆盖其上，每日淋水，以保证基质的潮湿。1 星期后可打开薄膜，继续养护2 一3 星期后便可成活。
3 结论与讨论
采用南姜的根状块茎作为外植体，由于该材料生长于地下，带菌量多，并且在其组织内部可能含有某些内生菌，在消毒过程中消毒剂较难穿透到组织内部困，使消毒效果不明显，材料污染率高。从试验消毒效果看，南姜的外植体宜选用75 ％乙醇处理30s十0.1 % HgCl2处理10 一15 min ，这样的不同消毒剂的搭配使用既可以最大幅度地降低污染率（可降低至12 % ) ，同时又能减少消毒剂对外植体的毒害作用（成活率可达64 % ）口外植体的选择应选用南姜块茎的幼芽作为接种的外植体较为理想，每个幼芽片均能长出2 一3 个幼芽。而利用嫩叶和幼根作为外植体时，难以诱导出分生芽和愈伤组织。这可能与刚萌动的幼芽组织中的芽原基活力较强，细胞分化程度较低，细胞分裂旺盛有着一定的关系川。已有的姜科植物组织培养研究报道中也多采用黄姜或者生姜的茎段、茎尖或者芽尖作为接种外植体直接诱导芽增殖途径进行繁殖。此外研究发现茎段、叶片作为外植体消毒效果不理想，存在着易污染的问题。南姜的芽诱导培养试验中，在0.5mg/L NAA 条件下，添加不同浓度的6-BA ，芽的萌发率有一定的差别。当添加6-BA 浓度为3 mg/L 时，新芽的诱导率达83.3 % ，幼芽增殖2 ~3 倍。幼芽较多，且粗壮。该激素配比有利于新芽的分化和幼芽增殖。
另外研究发现南姜组培苗生根比较容易，即使在无激素环境下也能够长出根，但效果较差。NAA 和IBA 搭配使用时根较细短，侧根生长稀疏。NAA 与6-BA 搭配使用时，生根率达100 % ，平均生根数12 ~15 条，根粗壮、发达，侧根生长密集，植株叶色浓绿，长势良好。

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