猪生殖和呼吸系统综合症病毒(Porcinereproductiveandrespiratorysyndromevirus,PRRSV) 猪生殖和呼吸系统综合症(间称PRRS)是近十年来发现的一种新的猪传染病。该病以母猪发热、厌食和流产、死产、木乃伊胎、弱仔等繁殖障碍以及仔猪的呼吸道症状和高死亡率为特征。1987年美国的北卡罗纳、衣阿华等州的猪群中首次暴发了一种以母猪繁殖障碍和仔猪严重呼吸困难为特征的传染病，并在全美迅速蔓延。1990年6月欧洲首先在德国出现本病。1990年底在荷兰的Lelystad首次分离到病原，命名为Lelystadvirus,简称LV，1992年美国也分离到病毒,命名为ATCCVR2332毒株。该病在德国出现后又很快传播到其它欧洲国家。到目前为止，大多数欧洲国家和部分亚洲国家均有此病发生的报道。该病刚流行时，由于病因不明，所以各个国家和地区的命名不一，最初称猪神秘病(mysteryswinedisease,MSD)，以后根据临床发病特征又称为猪蓝耳病(blueeardisease,)、猪不孕及呼吸综合症(swineinfertilityandrespiratorysyndrome,SIRS)和流行性流产与呼吸道综合症(porcineepidemicabortionandrespiratorysyndrome,PEARS)。1992年欧共体统一其病名为“猪生殖和呼吸系统综合症”(porcinereproductiveandrespiratorysyndrome,PRRS),目前这一病名已为大多数国家所接受。
1.形态与理化学特性PRRSV粒子呈球形，直径55～60nm，有囊膜，表面有纤突，见图21-2。在蔗糖和氯化铯中的浮密度分别为114g/cm3和119g/cm3。病毒核衣壳直径30～35nm，呈二十面立体对称，内含单股线状正链基因组RNA，长约151kb，是4种动脉炎病毒成员中最大的。基因组RNA具有感染性，3端有Poly(A)尾。病毒粒子上的蛋白质组成与EAV相似，N蛋白分子量15kDa，M蛋白分子量18kDa，囊膜糖蛋白E(相当于EAV的GL)分子量25kDa。
2.分子生物学序列测定证明，PRRSV(LV株)基因组为15101nt(包括13nt长的Poly(A)尾)。5端的帽结构尚不清楚，3端非编码区长114nt。基因组结构和蛋白质合成与EAV一样，有7个ORF，其中ORF1又分为1a和1b，ORF2～7编码6种亚基因组mRNA，它们同样有一个来自基因组5非编码区的引导序列，长度超过200nt，引导序列与mRNA序列间的连接区也高度保守，其核心序列为5UCAACC3，连接区到下游mRNA起始密码AUG的距离为8～83nt不等。ORF1a和ORF1b编码病毒复制酶和聚合酶等，ORF7编码N蛋白，ORF6编码M蛋白，ORF5编码囊膜糖蛋白E，ORF2编码类似于EAVGs的糖蛋白，ORF3～4可能编其它未知的囊膜蛋白。但Drew等(1995)用单克隆抗体研究了培养细胞中和纯化病毒粒子上的病毒蛋白，发现纯化的病毒粒子上可能存在一种45kDa的蛋白质，它可能由ORF3编码。PRRSV与EAV在蛋白质合成过程中的区别是前者的nsp1可进一步自身酶解为nsp1α和1β，而后者的nsp1却不能。
3.遗传变异与抗原性在血清学上，PRRSV与其它3种动脉炎病毒均没有抗原交叉，但基因组序列分析发现PRRSV与LDV的遗传关系明显近于它与EAV的遗传关系，如PRRSV欧洲毒株(Isolate10)的N蛋白与EAV和LDV相同蛋白质的氨基酸序列同源性分别为236%和448%；其M蛋白与EAV和LDV相同蛋白质的氨基酸序列同源性分别为272%和532%。虽然尚未发现PRRSV有不同血清型，但存在核苷酸序列变异较大的毒株，尤其是来源于不同地理位置的毒株之间的变异程度更大。根据基因的变异程度，目前将PRRSV分为2个不同的地理群(group)或基因型(genotype)，以欧洲原型病毒LV株为代表的欧洲基因型(简称A群)和以美国原型病毒ATCCVR2332株为代表的美国基因型(简称B群)。两群病毒在血清学上有明显不同，它们之间的基因序列差异较大，其M和N蛋白的氨基酸序列(病毒的保守基因)的同源性分别为57%～59%和78%～81%。两群病毒之间囊膜糖蛋白的氨基酸序列同源性也较低。即使在同一群内，如B群内不同毒株之间也存在着毒力以及抗原性的差异。最近(1994)首次从日本分离的3株PRRSV虽然在间接免疫荧光检测中均能与欧洲株和美国株的抗血清起反应，但在交叉免疫试验中，日本PRRSV在血清学上只表现出与美国株的抗原交叉性，而与欧洲毒株不交叉。血清学调查表明日本猪群流行的抗体对美国毒株的反应性明显高于对欧洲毒株的反应性。说明目前日本流行毒株的抗原性与美国株相近，而与欧洲株较远，可能是B群毒株。PRRSV没有血凝特性。
4.培养与增殖PRRSV可在原代猪肺巨噬细胞(primaryporcinealveolarmacrophages,PAM)、传代细胞系CL2621和Marc145(MA104细胞进一步克隆而来)中生长增殖。各种毒株对PAM均有很强的适应性。因为PAM是病毒最重要的靶细胞，病毒最初的分离就是用PAM获得的。所以用PAM能比较容易地分离野毒株。病毒在PAM生长较快，CPE出现较早(1～4天)，主要表现为细胞圆缩、聚集和快速崩解，但在CL2621和Marc145上生长稍慢，CPE出现稍晚(2～6天)，主要表现为细胞圆缩，聚集，最后脱落。病毒在以上3种细胞中的培养滴度可达105～107个TCID50。鸡胚和以下一些细胞均不支持PRRSV的增殖:猪的肺和呼吸道上皮细胞、心和肾的内皮细胞、骨髓、甲状腺和牛的上皮等原代细胞；鸡的内皮和鸡胚成纤维细胞；以及许多传代细胞系，如猪的鼻甲骨、PK15、牛鼻甲骨、Vero、BHK21、MDCK(狗肾)和CRFK(猫肾)等细胞系。Pol和Wagenar(1991)研究了PRRSV在PAM上的形态发生。接种6小时后，可见核衣壳从光面内质网出芽，9小时后，可在光面内质网池和高尔基体内见到成熟的有囊膜的病毒粒子。病毒复制在胞浆中进行，成熟的病毒粒子通过细胞的排粒作用(exocytosis)而释放(接毒后9～12小时)。
5.抵抗力由于有脂质囊膜，所以PRRSV对乙醚和氯仿等脂溶剂敏感。病毒在低温下能保持其稳定的感染性，但不耐热，56℃处理15～20分钟，37℃处理10～24小时，20℃放置6天或4℃保存1个月，病毒滴度将下降10倍。56℃45分钟或37℃48小时，病毒将彻底灭活。病毒在-70℃可保存4个月而滴度不降低。病毒在pH值低于5或高于7的环境中，其感染性将损失90%以上。
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