铁皮石斛的组织培养与快速繁殖二

2.3 铁皮石斛生长的最佳时间
将带有一个芽的铁皮石斛茎段接种于已经确定的最适基础培养基（MS ＋香蕉汁20 % ）上，在温度为22 ℃ ，每天光照12h ，光照强度为2000h 的条件下培养，分别于30d 、45d 、60d 和80d 统计诱导产生的丛生芽数。
由表3可以看出当培养3Od 是已经有明显的变化芽增殖数为15 。随着培养时间的增长芽的增殖数不断增加。10d 左右带有一个芽的铁皮石斛茎段开始有明显的变化。随着时间的增长逐渐有新的小芽长出，有的长成膨大芽。3Od 时芽增殖数已经达15个。当生长到6Od 时达到铁皮石斛的最高生长点。以后铁皮石斛的生长趋于平缓的生长。
2.4 激素对铁皮石斛丛生芽增殖的影响
2.4.1 NAA 浓度对铁皮石料丛生芽增殖的影响将6-BA 的浓度定为5mg/L ，向培养基（每种培养基中均加人20 ％的香蕉汁）中加入0.2 , 0.3 , 0.4 ( mg/L ）浓度的NAA ，将带有一个芽的铁皮石斛茎段接种于培养基上，每个梯度的外殖体数定为20 ，在温度为22 ℃ ，每天光照12h ，光照强度为ZOO0h 的条件下，培养60d ，统计丛生芽，进行梯度的筛选。由表4 可以看出在6 - BA 浓度为5mg/L 及添加物不变的情况下，当NAA 的浓度为0.3mg/L时平均增长的芽数最多为5.4 。由此可见当NAA 的浓度为0.3mg/L , 6-BA 浓度为5mg/L 时，铁皮石斛丛生芽的增殖率最高。
2.4.2  6 - BA 浓度对铁皮石斛丛生芽增殖的影响
将NAA 的浓度定为0.3 mg / L ，向MS 培养基（每种培养基中均加人20 ％的香蕉汁）中分别加人4 , 5 , 6 ( mg/L ）浓度的6-BA 。将带有一个芽的茎段接种于培养基（每种培养基中均加入20 ％的香蕉汁）上，在温度为22 ℃ ，每天光照12h ，光照强度为2 00Olx 的条件下，培养60d ，统计铁皮石斛丛生芽数。
由表5 可以看出在NAA 浓度0.3mg/L 及添加物不变的情况下，当6 - BA 的浓度为5mg/L 时平均增长的芽数最多为5.4 。由此可见当6-BA 的浓度为5 mg/L , NAA 的浓度为0.3mg/L 时，铁皮石斛丛生芽的增殖率最高。
2.5 壮苗与生根
当茎段产生的小苗长成1 一2 cm 高，并分化出1 一2 片叶片时，将小苗接种在小苗培养基中，接种60d 后记录生根情况。
无根小苗在接种2Od 后开始出现根的分化，在茎基部或节上出现浅黄绿色的突起，尖端的颜色较浅，长度约1 mm ，直径约0.8 mm 。接种约60d 后，各处理组的根的诱导率在4 ％一60 ％之间。平均根长可达2 一3 cm ，平均根直径可达0.2 一0.4 cm ，各处理组中平均根数最高可达6.33 条／株，最多单株根条数达9 条。根为浅绿色，在培养基中的吸收根表面光滑。一些小苗长出较长的气生根，暴露于空气中，气生根与吸收根的最大不同点在于其表面有成片分布的白色茸毛组成的根被，由根尖之后0.5 cm 开始延伸到根的近茎端。气生根最高可达4.56 cm ，直径0.5 cm ，叶片增大，呈长椭圆形，叶色由浅绿变为深绿，叶片变厚，有的品种叶片背面呈红色，尤其是叶背边缘的红色较明显。继续培养30 一60d ，根的诱导率继续提高，最高可达90 ％。叶片长度可达5 一8 cm ，小苗高3 一7 cm ，每株叶片2 一5 片。根的诱导率和生长状况，在不同浓度6-BA 与NAA 配比的培养基中的差异很大。试验结果表明NAA 浓度为0.1 mg / L 时，随6-BA 浓度的提高，根的诱导率先升后降，在6-BA 2.0 + NAA 0.1 组中诱导率可达60 ％。当6-BA 浓度达到3mg/L 时诱导率急剧下降，仅为5.00 ％NAA 0.1 组的平均根数和平均根长均随6-BA 浓度升高而降低。在NAA 浓度为0.3 mg / L 时，各6-BA 浓度的根诱导率和平均根数差异不大，诱导率总体水平较NAA 0.1 和NAA 0.5 组高，平均根数较NAA 0.1 组高。平均根长随6-BA 浓度提高而增加。在6-BA 3.0 十NAA 0.3 组中，平均根长达到最大值1.58 cm 。在NAA 浓度提到到0.5mg/L 时，诱导率反而下降，平均根数除6-BA 2.0 + NAA 0.5 组为全部组别中的最大值4.33 外，其余处理组平均根数比NAA 浓度0.3mg/L 和0.lmg/L 时低，平均根长与NAA 浓度没有明显的相关性。
从表7 中实验结果可以看出，添加不同浓度、不同比例的NAA 与6-BA 对铁皮石斛幼苗生根壮苗具有不同的影响。

上一篇：铁皮石斛的组织培养与快速繁殖一

下一篇：铁皮石斛的组织培养与快速繁殖三