微生物技术资料
文章检索
  首页 > 微生物知识->美国药典USP28微生物检测->无菌试验

无菌试验


录入时间:2008-9-5 9:25:55 来源:青岛海博

         
    MEDIA 
    Prepare media for the tests as described below, or dehydrated formulations 
may be used provided that, when reconstituted as directed by the manufacturer 
or distributor, they meet the requirements of the Growth Promotion Test of 
Aerobes, Anaerobes, and Fungi. Media are sterilized using a validated process.
 
The following culture media have been found to be suitable for the test for
 sterility. Fluid Thioglycollate Medium is primarily intended for the culture 
of anaerobic bacteria. However, it will also detect aerobic bacteria. Soybean–
Casein Digest Medium is suitable for the culture of both fungi and aerobic 
bacteria. 
                       Fluid Thioglycollate Medium 
 
             L-Cystine 0.5 g 
             Sodium Chloride 2.5 g 
             Dextrose (C6H12O6·H2O) 5.5/5.0 g 
             Agar, granulated (moisture content not
             exceeding 15%) 0.75 g 
             Yeast Extract (water-soluble) 5.0 g 
             Pancreatic Digest of Casein 15.0 g 
             Sodium Thioglycollate 0.5 g 
             or Thioglycolic Acid 0.3 mL 
             Resazurin Sodium Solution (1 in 1000),
             freshly prepared 1.0 mL 
             Purified Water 1000 mL 
    Mix the L-cystine, sodium chloride, dextrose, yeast extract, and 
pancreatic digest of casein with the purified water, and heat until solution 
is effected. Dissolve the sodium thioglycollate or thioglycolic acid in the 
solution and, if necessary, add 1 N sodium hydroxide so that, after 
sterilization, the solution will have a pH of 7.1 ± 0.2. If filtration is 
necessary, heat the solution again without boiling, and filter while hot 
through moistened filter paper. Add the resazurin sodium solution, mix, and 
place the medium in suitable vessels that provide a ratio of surface to depth
 of medium such that not more than the upper half of the medium has undergone
 a color change indicative of oxygen uptake at the end of the incubation 
period. Sterilize using a validated process. If the medium is stored, store at
 a temperature between 2 and 25 in a sterile, airtight container. If more than 
the upper one-third of the medium has acquired a pink color, the medium may be
 restored once by heating the containers in a water-bath or in free-flowing 
steam until the pink color disappears and by cooling quickly, taking care to 
prevent the introduction of nonsterile air into the container.
 
Fluid Thioglycollate Medium is to be incubated at 32.5 ± 2.5. 
   
               Alternative Thioglycollate Medium 
     Prepare a mixture having the same composition as that of the Fluid 
Thioglycollate Medium, but omitting the agar and the resazurin sodium 
solution, sterilize as directed above, and allow to cool prior to use. The pH 
after sterilization is 7.1 ± 0.2. Incubate under anaerobic conditions for the 
duration of the incubation period. 
    Alternative Fluid Thioglycollate Medium is to be incubated at 32.5 ± 2.5.
 
Soybean–Casein Digest Medium 
 
         Pancreatic Digest of Casein 17.0 g 
         Papaic Digest of Soybean Meal 3.0 g 
         Sodium Chloride 5.0 g 
         Dibasic Potassium Phosphate 2.5 g 
         Dextrose (C6H12O6·H2O) 2.5/2.3 g 
         Purified Water 1000 mL 
   Dissolve the solids in the Purified Water, heating slightly to effect a 
solution. Cool the solution to room temperature, and adjust the pH with 1 N 
sodium hydroxide so that, after sterilization, it will have a pH of 7.3 ± 
0.2. Filter, if necessary to clarify, dispense into suitable containers, and 
sterilize using a validated procedure. Store at a temperature between 2 and 25 
in a sterile well-closed container, unless it is intended for immediate use. 

Soybean–Casein Digest Medium is to be incubated at 22.5 ± 2.5. 
                 Media for Penicillins or Cephalosporins 
     Where sterility test media are to be used in the Direct Inoculation of 
the Culture Medium method under Test for Sterility of the Product to be 
Examined, modify the preparation of Fluid Thioglycollate Medium and the 
Soybean–Casein Digest Medium as follows. To the containers of each medium,
 transfer aseptically a quantity of b-lactamase sufficient to inactivate the 
amount of antibiotic in the specimen under test. Determine the quantity of b-
lactamase required to inactivate the antibiotic by using a b-lactamase 

 preparation that has been assayed previously for its penicillin- or 
cephalosporin-inactivating power. [NOTE—Supplemented b-lactamase media can 
also be used in the membrane filtration test.] 
    Alternatively (in an area completely separate from that used for sterility
 testing), confirm that an appropriate amount of b-lactamase is incorporated 
into the medium, following either method under Validation Test, using less 
than 100 colony-forming units (cfu) of Staphylococcus aureus (see Table 1) as
 the challenge. Typical microbial growth of the inoculated culture must be 
observed as a confirmation that the b-lactamase concentration is appropriate.
 
Table 1. Strains of the Test Microorganisms Suitable for Use in the Growth 
Promotion Test and the Validation Test 
 
                        Aerobic bacteria   
  Staphylococcus aureus1 ATCC 6538, CIP 4.83, NCTC 10788, NCIMB 9518 
  Bacillus subtilis ATCC 6633, CIP 52.62, NCIMB 8054 
  Pseudomonas aeruginosa2 ATCC 9027, NCIMB 8626, CIP 82.118 
Anaerobic bacterium   
  Clostridium sporogenes3 ATCC 19404, CIP 79.3, NCTC 532 or ATCC 11437 
Fungi   
  Candida albicans ATCC 10231, IP 48.72, NCPF 3179 
  Aspergillus niger ATCC 16404, IP 1431.83, IMI 149007 
1 、 An alternative to Staphylococcus aureus is Bacillus subtilis (ATCC 
6633).  
2 、 An alternative microorganism is Micrococcus luteus (Kocuria rhizophila), 
ATCC 9341.   
3 、 An alternative to Clostridium sporogenes, when a nonspore-forming 
microorganism is desired, is Bacetroides vulgatus (ATCC 8482).   
[NOTE—Seed-lot culture maintenance techniques (seed-lot systems) are used so 
that the viable microorganisms used for inoculation are not more than five 
passages removed from the original master seed lot.]  
                         Suitability Tests 
    The media used comply with the following tests, carried out before, or in 
parallel, with the test on the product to be examined. 
                           
                              STERILITY 
    Confirm the sterility of each sterilized batch of medium by incubating a 
portion of the media at the specified incubation temperature for 14 days. No 
growth of microorganisms occurs. 
               GROWTH PROMOTION TEST OF AEROBES, ANAEROBES, AND FUNGI 
   Test each lot of of ready-prepared medium and each batch of medium prepared 
either from dehydrated medium or from ingredients 1 . Suitable strains of 
microorganisms are indicated in Table 1. 
   Inoculate portions of Fluid Thioglycollate Medium with a small number (not 
more than 100 cfu) of the following microorganisms, using a separate portion 
of medium for each of the following species of microorganism: Clostridium 
sporogenes, Pseudomonas aeruginosa, and Staphylococcus aureus. Inoculate 
portions of Alternative Fluid Thioglycollate Medium with a small number (not 
more than 100 cfu) of Clostridium sporogenes. Inoculate portions of Soybean–
Casein Digest Medium with a small number (not more than 100 cfu) of the 
following microorganisms, using a separate portion of medium for each of the 
following species of microorganism: Aspergillus niger, Bacillus subtilis, and 
Candida albicans. Incubate for not more than 3 days in the case of bacteria 
and not more than 5 days in the case of fungi. 
    The media are suitable if a clearly visible growth of the microorganisms 
occurs. 
                                  STORAGE 
   If prepared media are stored in unsealed containers, they can be used for 1
 month, provided that they are tested for growth promotion within 2 weeks of
 the time of use and that color indicator requirements are met. If stored in
 tight containers, the media can be used for 1 year, provided that they are 
tested for growth promotion within 3 months of the time of use and that the 
color indicator requirements are met. 
         DILUTING AND RINSING FLUIDS FOR MEMBRANE FILTRATION 
                                Fluid A 
                              PREPARATION 
   Dissolve 1 g of peptic digest of animal tissue in water to make 1 L, filter 
or centrifuge to clarify, if necessary, and adjust to a pH of 7.1 ± 0.2. 
Dispense into containers, and sterilize using a validated process. 
PREPARATION FOR PENICILLINS OR CEPHALOSPORINS 
  Aseptically add to the above Preparation, if necessary, a quantity of 
sterile b-lactamase sufficient to inactivate any residual antibiotic activity
 on the membranes after the solution of the test specimen has been filtered 
(see Media for Penicillins or Cephalosporins). 
                               Fluid D 
   To each L of Fluid A add 1 mL of polysorbate 80, adjust to a pH of 7.1 ± 
0.2, dispense into containers, and sterilize using a validated process. Use 
this fluid for articles containing lecithin or oil, or for devices labeled as 
“sterile pathway.” 
                              Fluid K 
   Dissolve 5.0 g of peptic digest of animal tissue, 3.0 g of beef extract,
 and 10.0 g of polysorbate 80 in water to make 1 L. Adjust the pH to obtain, 
after sterilization, a pH of 6.9 ± 0.2. Dispense into containers, and 
sterilize using a validated process. 
                          VALIDATION TEST 
   Carry out a test as described below under Test for Sterility of the Product
 to be Examined using exactly the same methods, except for the following 
modifications. 
                         Membrane Filtration 
    After transferring the content of the container or containers to be tested 
(not more than 100 cfu) to the final portion of sterile diluent used to rinse 
the filter. 
                           Direct Inoculation 
    After transferring the contents of the container or containers to be 
tested (for catgut and other surgical sutures for veterinary use: strands) to 
the culture medium, add an inoculum of a small number of viable microorganisms 
(not more than 100 cfu) to the medium. 
   In both cases use the same microorganisms as those described above under
 Growth Promotion Test of Aerobes, Anaerobes, and Fungi. Perform a growth 
promotion test as a positive control. Incubate all the containers containing
 medium for not more than 5 days. 
   If clearly visible growth of microorganisms is obtained after the 
incubation, visually comparable to that in the control vessel without product,
 either the product possesses no antimicrobial activity under the conditions 
of the test or such activity has been satisfactorily eliminated. The test for 
sterility may then be carried out without further modification. 
   If clearly visible growth is not obtained in the presence of the product to
 be tested, visually comparable to that in the control vessels without 
product, the product possesses antimicrobial activity that has not been 
satisfactorily eliminated under the conditions of the test. Modify the 
conditions in order to eliminate the antimicrobial activity, and repeat the 
validation test. 
   This validation is performed (a) when the test for sterility has to be 
carried out on a new product; and (b) whenever there is a change in the 
experimental conditions of the test. The validation may be performed 
simultaneously with the Test for Sterility of the Product to be Examined. 
              TEST FOR STERILITY OF THE PRODUCT TO BE EXAMINED 
                      Number of Articles to Be Tested 
     Unless otherwise specified elsewhere in this chapter or in the individual
 monograph, test the number of articles specified in Table 3. If the contents 
of each article are of sufficient quantity (see Table 2), they may be divided 
so that equal appropriate portions are added to each of the specified media.
 [NOTE—Perform sterility testing employing two or more of the specified 
media.] If each article does not contain sufficient quantities for each 
medium, use twice the number of articles indicated in Table 3. 
Table 2. Minimum Quantity to be Used for Each Medium 
 
     Quantity per Container Minimum Quantity to be Used (unless otherwise 
justified and authorized) 
    Liquids (other than anitbiotics)   
    Less than 1 mL The whole contents of each container 
    1–40 mL Half the contents of each container, but not less than 1 mL 
    Greater than 40 mL, and not greater than 100 mL 20 mL 
    Greater than 100 mL 10% of the contents of the container, but not less 
than 20 mL 
    Antibiotic liquids 1 mL 
    Other preparations soluble in water or in isopropyl myristate The whole 
contents of each container to provide not less than 200 mg 
    
   Insoluble preparations, creams, and ointments to be suspended or emulsified 
Use the contents of each container to provide not less than 200 mg 
    
                                Solids 
   Less than 50 mg: The whole contents of each container 50 mg or more, but 
less than 300 mg Half the contents of each container, but not less than 50 mg 
300 mg–5 g 150 mg ,Greater than 5 g 500 mg 
    
                                 Devices   
     Catgut and other surgical sutures for veterinary use 3 sections of a 
strand (each 30-cm long) 
    Surgical dressing/cotton/gauze (in packages) 100 mg per package 
    Sutures and other individually packaged single-use material The whole 
device 
    Other medical devices The whole device, cut into pieces or disassembled 

Table 3. Minimum Number of Articles to be Tested in Relation to the Number of 
Articles in the Batch 
 
Number of Items in the Batch Minimum Number of Items to be Tested for Each 
Medium (unless otherwise justified and authorized)* 
                        Parenteral preparations   
  Not more than 100 containers 10% or 4 containers, whichever is the greater 
  More than 100 but not more than 500 containers 10 containers 
  More than 500 containers 2% or 20 containers, whichever is less 
  For large-volume parenterals 2% or 10 containers, whichever is less 
    
                       Antibiotic solids   
  Pharmacy bulk packages (<5 g) 20 containers 
  Pharmacy bulk packages (³5 g) 6 containers 
  Bulks and blends See Bulk solid products 
    
  Ophthalmic and other noninjectable preparations   
  Not more than 200 containers 5% or 2 containers, whichever is the greater 
  More than 200 containers 10 containers 
  If the product is presented in the form of single-dose containers, apply the
 scheme shown above for preparations for parenteral use.   
    
                          Devices   
  Catgut and other surgical sutures for veterinary use 2 or5packages,whichever
 is the greater,up to a maximum total of 20 packages .Not more than 100 
articles 10% or 4 articles, whichever is greater .More than 100, but not more 
than 500 articles 10 articles .More than 500 articles 2% or 20 articles, 
whichever is less 
    
                            Bulk solid products   
   Up to 4 containers Each container 
   More than 4 containers, but not more than 50 containers 20% or 4 
containers, whichever is greater 
   More than 50 containers 2% or 10 containers, whichever is greater 
   If the contents of one container are enough to inoculate the two media,
 this column gives the number of containers needed for both the media 
together.  
   The test may be carried out using the technique of Membrane Filtration or 
by Direct Inoculation of the Culture Medium with the product to be examined.
 Appropriate negative controls are included. The technique of membrane 
filtration is used whenever the nature of the product permits; that is, for 
filterable aqueous preparations, for alcoholic or oily preparations, and for 
preparations miscible with, or soluble in, aqueous or oily solvents, provided 
these solvents do not have an antimicrobial effect in the conditions of the test. 
                             Membrane Filtration 
    Use membrane filters having a nominal pore size not greater than 0.45 µm
 whose effectiveness to retain microorganisms has been established. Cellulose 
nitrate filters, for example, are used for aqueous, oily, and weakly alcoholic 
solutions; and cellulose acetate filters, for example, are used for strongly 
alcoholic solutions. Specially adapted filters may be needed for certain 
products (e.g., for antibiotics). 

    The technique described below assumes that membranes about 50 mm in 
diameter will be used. If filters of a different diameter are used, the 
volumes of the dilutions and the washings should be adjusted accordingly. The
 filtration apparatus and membrane are sterilized by appropriate means. The 
apparatus is designed so that the solution to be examined can be introduced
 and filtered under aseptic conditions: it permits the aseptic removal of the
 membrane for transfer to the medium, or it is suitable for carrying out the 
incubation after adding the medium to the apparatus itself.
 
AQUEOUS SOLUTIONS 
    If appropriate, transfer a small quantity of a suitable, sterile diluent
 such as Fluid A (see Diluting and Rinsing Fluids for Membrane Filtration) 
onto the membrane in the apparatus and filter. The diluent may contain 
suitable neutralizing substances and/or appropriate inactivating substances,
 for example, in the case of antibiotics.
 
   Transfer the contents of the container or containers to be tested to the 
membrane or membranes, if necessary, after diluting to the volume used in the
 Validation Test with the chosen sterile diluent, but using not less than the
 quantities of the product to be examined prescribed in Tables 2 and 3. Filter
 immediately. If the product has antimicrobial properties, wash the membrane 
not less than three times by filtering through it each time the volume of the 
chosen sterile diluent used in the Validation Test. Do not exceed a washing 
cycle of 5 times 200 mL, even if during validation it has been demonstrated 
that such a cycle does not fully eliminate the antimicrobial activity.          
   Transfer the whole membrane to the culture medium or cut it aseptically 
into two equal parts, and transfer one half to each of two suitable media. Use 
the same volume of each medium as in the Validation Test. Alternatively, 
transfer the medium onto the membrane in the apparatus. Incubate the media for 
not less than 14 days. 
                SOLUBLE SOLIDS (other than antibiotics) 
   Use for each medium not less than the quantity prescribed in Tables 2 and 3 
of the product dissolved in a suitable solvent, such as Fluid A (Diluting and 
Rinsing Fluids for Membrane Filtration), and proceed with the test as 
described above for Aqueous Solutions using a membrane appropriate to the 
chosen solvent. 
                      OILS AND OILY SOLUTIONS 
   Use for each medium not less than the quantity of the product prescribed in 
Tables 2 and 3. Oils and oily solutions of sufficiently low viscosity may be 
filtered without dilution through a dry membrane. Viscous oils may be diluted 
as necessary with a suitable sterile diluent such as isopropyl myristate shown
 not to have antimicrobial activity in the conditions of the test. Allow the 
oil to penetrate the membrane by its own weight, and then filter, applying the
 pressure or suction gradually. Wash the membrane at least three times by 
filtering through it each time about 100 mL of a suitable sterile solution 
such as Fluid A (see Diluting and Rinsing Fluids for Membrane Filtration) 
containing a suitable emulsifying agent at a concentration shown to be 
appropriate in the validation of the test, for example polysorbate 80 at a 
concentration of 10 g per L (Fluid K). Transfer the membrane or membranes to 
the culture medium or media, or vice versa, as described above for Aqueous 
Solutions, and incubate at the same temperatures and for the same times. 

                         OINTMENTS AND CREAMS 
   Use for each medium not less than the quantities of the product prescribed 
in Tables 2 and 3. Ointments in a fatty base and emulsions of the water-in-oil
 type may be diluted to 1% in isopropyl myristate as described above, by 
heating, if necessary, to not more than 40. In exceptional cases it may be 
necessary to heat to not more than 44. Filter as rapidly as possible, and 
proceed as described above for Oils and Oily Solutions. 
                        PREFILLED SYRINGES 
  For prefilled syringes without attached sterile needles, expel the contents 
of each syringe into one or two separate membrane filter funnels or into 
separate pooling vessels prior to transfer. If a separate sterile needle is 
attached, directly expel the syringe contents as indicated above, and proceed 
as directed for Aqueous Solutions. Test the sterility of the needle, using 
Direct Inoculation under Validation Test. 
               SOLIDS FOR INJECTION OTHER THAN ANTIBIOTICS 
   Constitute the test articles as directed on the label, and proceed as 
directed for Aqueous Solutions or Oils and Oily Solutions, whichever applies.
 [NOTE—If necessary, excess diluent can be added to aid in the constitution 
and filtration of the constituted test article.] 
                       ANTIBIOTIC SOLIDS FOR INJECTION 
   Pharmacy Bulk Packages, < 5 g— From each of 20 containers, aseptically 
transfer about 300 mg of solids, into a sterile 500-mL conical flask, dissolve 
in about 200 mL of Fluid A (see Diluting and Rinsing Fluids for Membrane 
Filtration), and mix; or constitute, as directed in the labeling, each of 20 
containers and transfer a quantity of liquid or suspension, equivalent to 
about 300 mg of solids, into a sterile 500-mL conical flask, dissolve in about
 200 mL of Fluid A, and mix. Proceed as directed for Aqueous Solutions or Oils
 and Oily Solutions, whichever applies. 
   Pharmacy Bulk Packages, ³5 g— From each of 6 containers, aseptically 
transfer about 1 g of solids into a sterile 500-mL conical flask, dissolve in 
about 200 mL of Fluid A, and mix; or constitute, as directed in the labeling,
 each of 6 containers and transfer a quantity of liquid, equivalent to about 1
 g of solids, into a sterile 500-mL conical flask, dissolve in about 200 mL of
 Fluid A, and mix. Proceed as directed for Aqueous Solutions. 
                   ANTIBIOTIC SOLIDS, BULKS, AND BLENDS 
   Aseptically remove a sufficient quantity of solids from the appropriate 
amount of containers (see Table 2), mix to obtain a composite, equivalent to 
about 6 g of solids, and transfer to a sterile 500-mL conical flask. Dissolve 
in about 200 mL of Fluid A, and mix. Proceed as directed for Aqueous Solutions. 
                              STERILE AEROSOL PRODUCTS 
   For fluid products in pressurized aerosol form, freeze the containers in an 
alcohol-dry ice mixture at least at –20 for about 1 hour. If feasible, allow 
the propellant to escape before aseptically opening the container, and 
transfer the contents to a sterile pooling vessel. Add 100 mL of Fluid D to 
the pooling vessel, and mix gently. Proceed as directed for Aqueous Solutions
 or Oils and Oily Solutions, whichever applies. 
                    DEVICES WITH PATHWAYS LABELED STERILE 
   Aseptically pass not less than 10 pathway volumes of Fluid D through each
 device tested. Collect the fluids in an appropriate sterile vessel, and
 proceed as directed for Aqueous Solutions or Oils and Oily Solutions, 
whichever applies. 
   In the case of sterile, empty syringes, draw sterile diluent into the 
barrel through the sterile needle, if attached, or through a sterile needle 
attached for the purpose of the test, and express the contents into a sterile 
pooling vessel. Proceed as directed above. 
                 Direct Inoculation of the Culture Medium 
   Transfer the quantity of the preparation to be examined prescribed in 
Tables 2 and 3 directly into the culture medium so that the volume of the 
product is not more than 10% of the volume of the medium, unless otherwise 
prescribed. 
   If the product to be examined has antimicrobial activity, carry out the 
test after neutralizing this with a suitable neutralizing substance or by 
dilution in a sufficient quantity of culture medium. When it is necessary to 
use a large volume of the product, it may be preferable to use a concentrated 
culture medium prepared in such a way that it takes into account the 
subsequent dilution. Where appropriate, the concentrated medium may be added 
directly to the product in its container. 
                             OILY LIQUIDS 
    Use media to which have been added a suitable emulsifying agent at a 
concentration shown to be appropriate in the validation of the test, for 
example polysorbate 80 at a concentration of 10 g per liter. 
                         OINTMENTS AND CREAMS 
    Prepare by diluting to about 1 in 10 by emulsifying with the chosen 
emulsifying agent in a suitable sterile diluent such as Fluid A (see Diluting 
and Rinsing Fluids for Membrane Filtration). Transfer the diluted product to a 
medium not containing an emulsifying agent. 
   Incubate the inoculated media for not less than 14 days. Observe the 
cultures several times during the incubation period. Shake cultures containing 
oily products gently each day. However, when thioglycollate medium or other
 similar medium is used for the detection of anaerobic microorganisms, keep 
shaking or mixing to a minimum in order to maintain anaerobic conditions. 
         CATGUT AND OTHER SURGICAL SUTURES FOR VETERINARIAN USE 
Use for each medium not less than the quantities of the product prescribed in
 Tables 2 and 3. Open the sealed package using aseptic precautions, and remove
 three sections of the strand for each culture medium. Carry out the test on 
three sections, each 30-cm long, which have been cut off from the beginning, 
the center, and the end of the strand. Use whole strands from freshly opened 
cassette packs. Transfer each section of the strand to the selected medium.
 Use sufficient medium to cover adequately the material to be tested (20 mL to 150 mL). 
                               SOLIDS 
    Transfer a quantity of the product in the form of a dry solid (or prepare 
a suspension of the product by adding sterile diluent to the immediate 
container), corresponding to not less than the quantity indicated in Tables 2 
and 3. Transfer the material so obtained to 200 mL of Fluid Thioglycollate 
Medium, and mix. Similarly, transfer the same quantity to 200 mL of Soybean–
Casein Digest Medium, and mix. Proceed as directed above. 
      PURIFIED COTTON, GAUZE, SURGICAL DRESSINGS, AND RELATED ARTICLES 
  From each package of cotton, rolled gauze bandage, or large surgical 
dressings being tested, aseptically remove two or more portions of 100- to 500-
mg each from the innermost part of the sample. From individually packaged, 
single-use materials, aseptically remove the entire article. Immerse the
 portions or article in each medium, and proceed as directed above. 
                                 STERILE DEVICES 
   Articles can be immersed intact or disassembled. To ensure that device 
pathways are also in contact with the media, immerse the appropriate number of
 units per medium in a volume of medium sufficient to immerse the device 
completely, and proceed as directed above. For extremely large devices, 
immerse those portions of the device that are to come into contact with the 
patient in a volume of medium sufficient to achieve complete immersion of 
those portions. 
  For catheters where the inside lumen and outside are required to be sterile, 
either cut them into pieces such that the medium is in contact with the entire 
lumen or fill the lumen with medium, and then immerse the intact unit. 
                    OBSERVATION AND INTERPRETATION OF RESULTS 
   At intervals during the incubation period and at its conclusion, examine 
the media for macroscopic evidence of microbial growth. If the material being
 tested renders the medium turbid so that the presence or absence of microbial
 growth cannot be readily determined by visual examination, 14 days after the
 beginning of incubation transfer portions (each not less than 1 mL) of the 
medium to fresh vessels of the same medium, and then incubate the original and 
transfer vessels for not less than 4 days. 
   If no evidence of microbial growth is found, the product to be examined 
complies with the test for sterility. If evidence of microbial growth is 
found, the product to be examined does not comply with the test for sterility,
 unless it can be clearly demonstrated that the test was invalid for causes 
unrelated to the product to be examined. The test may be considered invalid 
only if one or more of the following conditions are fulfilled: 

The data of the microbiological monitoring of the sterility testing facility 
show a fault. 
   A review of the testing procedure used during the test in question reveals 
a fault. 
   Microbial growth is found in the negative controls. 
   After determination of the identity of the microorganisms isolated from the 
test, the growth of this species (or these species) may be ascribed 
unequivocally to faults with respect to the material and or the technique used 
in conducting the sterility test procedure. 
   If the test is declared to be invalid, it is repeated with the same number
 of units as in the original test. If no evidence of microbial growth is found 
in the repeat test, the product examined complies with the test for sterility.
 If microbial growth is found in the repeat test, the product examined does 
not comply with the test for sterility. 
  APPLICATION OF THE TEST TO PARENTERAL PREPARATIONS, OPHTHALMIC, AND OTHER 
NONINJECTABLE PREPARATIONS REQUIRED TO COMPLY WITH THE TEST FOR STERILITY 
   When using the technique of membrane filtration, use, whenever possible,
 the whole contents of the container, but not less than the quantities 
indicated in Tables 2 and 3, diluting where necessary to about 100 mL with a 
suitable sterile solution, such as Fluid A (see Diluting and Rinsing Fluids 
for Membrane Filtration). 
   When using the technique of direct inoculation of media, use the quantities
 shown in Tables 2 and 3, unless otherwise justified and authorized. The tests 
for bacterial and fungal sterility are carried out on the same sample of the 
product to be examined. When the volume or the quantity in a single container 
is insufficient to carry out the tests, the contents of two or more containers 
are used to inoculate the different media.
   In appropriate cases, periodic testing of the different batches prepared 
from the same lot of dehydrated medium is acceptable. 
   
   

 

上一篇:没有了!

下一篇:微生物限度检查

相关文章:
常见非无菌产品确认与验证流程概图 新版GMP---无菌药品
非无菌产品微生物限度检查:微生物计数法 无菌控制
2015版中国药典--无菌检测风险控制 无菌冷灌装技术的清洁消毒和卫生控制
商业无菌检验 药典微生物检验问题解答汇总-无菌
药品生产企业无菌检验实验室调研报告 无菌检测法——方法验证试验
首页 | 关于我们 | 网上商城 | 加入收藏 | 在线客服 | 网站地图| 联系我们
地址:青岛市李沧区龙水路318号D座
电话:400-0532-596 0532-66087773
66087762、81935169

传真:0532-81935080 66087775

邮箱:qdhbywg@vip.126.com

QQ:4000532596

投诉与建议
电话:13105190021 13006536294
邮箱:hopebiol@163.com
©2001- 版权所有 青岛高科技工业园海博生物技术有限公司 鲁ICP备05018323号