微生物技术资料
文章检索
  首页 > 微生物知识->美国药典USP28微生物检测->ANTIBIOTICS—MICROBIAL ASSAYS(抗生素的微生物检测)

ANTIBIOTICS—MICROBIAL ASSAYS(抗生素的微生物检测)


录入时间:2008-9-8 16:57:44 来源:青岛海博

            ANTIBIOTICS—MICROBIAL ASSAYS(抗生素的微生物检测) 
The activity (potency) of antibiotics may be demonstrated under suitable 
conditions by their inhibitory effect on microorganisms. A reduction in 
antimicrobial activity also will reveal subtle changes not demonstrable by 
chemical methods. Accordingly, microbial or biological assays remain generally 
the standard for resolving doubt with respect to possible loss of activity. This
 chapter summarizes these procedures for the antibiotics recognized in this 
Pharmacopeia for which microbiological assay remains the definitive method.
  Two general methods are employed, the cylinder-plate or “plate” assay(“板”
法)and the turbidimetric or “tube” assay(“管”法). The first depends upon 
diffusion of the antibiotic from a vertical cylinder through a solidified agar 
layer in a petri dish or plate to an extent such that growth of the added 
microorganism is prevented entirely in a circular area or “zone” around the 
cylinder containing a solution of the antibiotic. The turbidimetric method 
depends upon the inhibition of growth of a microbial culture in a uniform 
solution of the antibiotic in a fluid medium that is favorable to its rapid 
growth in the absence of the antibiotic.
           APPARATUS (仪器)
All equipment is to be thoroughly cleaned before and after each use. 
Glassware(玻璃仪器)for holding and transferring test organisms is sterilized
 by dry heat or by steam.
          Temperature Control (温度控制)
Thermostatic control is required in several stages of a microbial assay, when 
culturing a microorganism and preparing its inoculum, and during incubation in 
plate and tube assays. Maintain the temperature of assay plates at ±0.5  of the 
temperature selected. Closer control of the temperature (±0.1  of the selected 
temperature) is imperative during incubation in a tube assay, and may be 
achieved in either circulated air or water, the greater heat capacity of water 
lending it some advantage over circulating air. 
            Spectrophotometer(分光光度计)
Measuring transmittance within a fairly narrow frequency band requires a 
suitable spectrophotometer in which the wavelength of the light source can be 
varied or restricted by the use of a 580-nm filter or a 530-nm filter for 
reading the absorbance in a tube assay. For the latter purpose, the instrument 
may be arranged to accept the tube in which incubation takes place (see 
Turbidimetric Assay Receptacles), to accept a modified cell fitted with a drain 
that facilitates rapid change of content, or preferably, fixed with a 
flow-through cell for a continuous flow-through analysis; set the instrument at 
zero absorbance with clear, uninoculated broth prepared as specified for the
 particular antibiotic, including the same amount of test solution and 
formaldehyde as found in each sample.
NOTE—Either absorbance or transmittance measurement may be used for preparing
 inocula.
        Cylinder-Plate Assay Receptacles(板法) 
For assay plates, use glass or plastic petri dishes (approximately 20 × 100 mm)
 having covers of suitable material. For assay cylinders, use stainless steel or
 porcelain cylinders with the following dimensions, each dimension having a 
tolerance of ±0.1 mm: outside diameter 8 mm; inside diameter 6 mm; and length
 10 mm. Carefully clean cylinders to remove all residues. An occasional acid 
bath, e.g., with about 2 N nitric acid or with chromic acid (see Cleaning Glass 
Apparatus á1051ñ) is needed.
       Turbidimetric Assay Receptacles(管法) 
For assay tubes, use glass or plastic test tubes, e.g., 16 × 125 mm or 18 ×
 150 mm that are relatively uniform in length, diameter, and thickness and 
substantially free from surface blemishes and scratches. Tubes that are to be 
placed in the spectrophotometer are matched and are without scratches or 
blemishes. Cleanse thoroughly to remove all antibiotic residues and traces of 
cleaning solution, and sterilize tubes that have been used previously, before 
subsequent use. 
        MEDIA(培养基) AND DILUENTS(稀释剂)
   Media
The media required for the preparation of test organism inocula are made from 
the ingredients listed herein. Minor modifications of the individual 
ingredients, or reconstituted dehydrated media, may be substituted, provided the
 resulting media possess equal or better growth-promoting properties and give a 
similar standard curve response.
Dissolve the ingredients in water to make 1 L, and adjust the solutions with 
either 1 N sodium hydroxide or 1 N hydrochloric acid as required, so that after 
steam sterilization the pH is as specified.
   
   

 

上一篇:微生物限度检查

下一篇:美国药典(USP)简介

相关文章:
改良Eijkman试验 普遍性转导(generalized transduction)
白色念珠菌细胞壁β-葡聚糖(β-glucan)的研究进展 摩根氏菌属(Morganella)
泛菌属(Pantoea) API Candida 假丝酵母鉴定系统(Ref. 10 500)
原生动物(protozoan) 蓝细菌(Cyanobacteria)
首页 | 关于我们 | 网上商城 | 加入收藏 | 在线客服 | 网站地图| 联系我们
地址:青岛市李沧区龙水路318号D座
电话:400-0532-596 0532-66087773
66087762、81935169

传真:0532-81935080 66087775

邮箱:qdhbywg@vip.126.com

QQ:4000532596

投诉与建议
电话:13105190021 13006536294
邮箱:hopebiol@163.com
©2001- 版权所有 青岛高科技工业园海博生物技术有限公司 鲁ICP备05018323号