犬瘟热病毒诊断根据流行病学资料和临床症状，可以作出初步诊断。包涵体检查是诊断犬瘟热的重要辅助方法。包涵体主要存在于膀胱、胆管、胆囊和肾盂上皮细胞内。取清洁载玻片，滴加生理水1滴。用小刀在膀胱粘膜上刮取上皮细胞，小心混于载玻片上的生理盐水中，轻轻研匀，制成涂片。置空气中自然干燥后，用甲醇固定，苏木素－伊红染色后镜检。细胞核染成蓝紫色，细胞浆呈淡玫瑰色，包涵体被染成红色。包涵体大多在胞浆内，1个细胞内可能含有1～10个多形性包涵体，但一般呈现圆形或椭圆形。最后确诊需要依靠病毒的分离鉴定或血清学检查。
(1)病料采集从病兽分离病毒，取决于疾病类型。在体温开始上升的病毒血症早期，淋巴组织的感染最为严重，因此最好从淋巴细胞和淋巴组织分离病毒。于急性病兽或急性死亡动物，病毒充斥于全身各器官，故易从淋巴组织(脾脏、胸腺、淋巴结)以及肝、肺和膀胱等脏器分离获得病毒。如有脑炎症状，则应选择小脑。在亚急性或慢性病例中，血清含有中和抗体；在后期脑炎的病例中，脑脊髓液内也含中和抗体。此时分离病毒就比较因难，可试用肾脏或脑组织分离病毒。直接应用病兽肾脏进行细胞培养，较易分离获得病毒。
(2)病毒分离鉴定犬瘟热病毒能够适应许多种类的细胞培养物，包括犬和貂的肾和肺细胞，但是病毒生长常很缓慢，有时接种几周后才出现细胞病变。因此，分离犬瘟热病毒的最好方法是用犬和貂的巨噬细胞培养物。易感犬或无母源抗体幼犬的肺巨噬细胞对犬瘟热病毒易感。相反，自动免疫犬的肺巨噬细胞对病毒不易感。肺巨噬细胞的制备方法是：将肺剪碎，投入细胞营养液中，在25℃摇震约1小时，使肺泡巨噬细胞释出，随后收集巨噬细胞，用洗液洗涤一次，在199营养液(内加犊牛血清，pH7.0)中作成1：150悬液，并分装试管或培养瓶，置36℃培养过夜，待细胞吸附后即可换液和接种病料。病料悬液需先作成1%～10%不同稀释度，因未稀释病料常对细胞产生毒性。培养于37℃，每天检查，观察2～5天内有无圆形多核巨细胞形成。巨细胞容易脱落，而且并非所有细胞都形成巨细胞，故应多次仔细检查，同时可用免疫酶染色技术或荧光抗体技术和琼脂扩散试验检测病毒抗原，或作电镜观察。也可以应用核酸检测技术，如病毒核酸探针和RT－PCR等，进行诊断。分离获得病毒后即可应用已知免疫血清进行中和试验作进一步鉴定。免疫血清制备，是先用灭活病毒给犬接种，2周后再用强毒滴鼻，最后一次接种后10～14天采血，析得血清。(3)动物接种雪貂最易感，死亡率接近100%，任何途径接种后均可在8～14天内死亡。或者选用断乳15天后的幼兽(犬、水貂)。皮下、肌肉或腹腔注射10倍稀释病料悬液3～5ml。犬瘟热病毒也能在鸡胚、小鼠和仓鼠中适应生长，但敏感性较低。
(4)血清学诊断多年来一直用适应鸡胚的毒株在鸡胚中作被检血清的生长抑制试验，以检查犬的免疫状况。方法是将待检血清稀释(但不超过1：4)，加于等量已知病毒液(100～1000EID50)中，37℃感作１小时后接种8～9日龄鸡胚绒毛尿囊膜。再置35～37℃孵育7天，检查绒毛尿囊膜上有无灰白色病斑。多种细胞培养物可用于中和试验，但均不及鸡胚敏感。近年来用绿猴肾细胞株Vero作中和试验似乎很有希望。一般是在微量培养板上进行：先在每孔内加入0.05ml细胞营养液(内含10%犊牛血清的199营养液)，将被检血清连续倍比稀释，共8个稀释度，随后各孔加0.05ml病毒液(约含30TCID50)。将血清－病毒混合液置25℃感作2小时，再在各孔中加入0.05ml细胞悬液(含20，000个绿猴肾细胞)。加塑料盖，置5%CO2条件下培养于35～36℃。于接种后3天作染色检查，即以甲醇固定细胞单层10～20分钟，空气干燥后，用姬姆萨染色20分钟，冲洗后检查巨细胞。与病毒对照孔相比，以使巨细胞数减少50%者为终点。也常应用补体结合试验和ELISA方法检测特异性抗体的存在。补体结合抗体在感染后3～4周出现，几周后消失，因此查出补结抗体就证明为近期感染。急性病犬可用荧光抗体法检查淋巴细胞、结膜和阴道细胞或肺涂片，阳性细胞的胞浆呈弥散性荧光。对于已有中和抗体的亚急性或慢性病犬，通常难以找到阳性荧光细胞。
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