牛瘟病毒诊断(1)病料采取应在特征性症状出现以前3～4天，无菌采集抗凝血和其它组织，也可应用活体检查法采集淋巴结。剖检时最好的病料是脾脏和淋巴结，特别是肠系膜淋巴结。将病料置于少量含抗生素的缓冲盐水中。如在发病晚期，病畜已有口腔病变，则最好采集扁桃体或肺组织。这些病料应立即用冰冷却，如不立即接种，应迅速贮存于-70℃以下。(2)病毒分离鉴定通常应用培养细胞分离病毒。采取抗凝血液10～20ml，分离白细胞，或者用脾脏或淋巴结制成5%悬液，稍加离心沉淀。将粗制白细胞悬液或组织悬液接种于牛肾原代或继代细胞，24小时后洗去接种物。每2～3天换液一次。营养液为E－MEM，内含10%无抗体的犊牛血清。细胞病变最早在接种后3天于细胞单层的边缘开始出现，但某些毒株于接种后10～12天仍无明显变化。特征性细胞病变是形成星状细胞或合胞体，出现核内和胞浆内包涵体。高滴度的康复血清或高免血清能抑制细胞病变的出现，为了尽快作出诊断，可同时在接种管的营养液中加入免疫血清作病毒抑制试验。(3)动物接种检出牛瘟病毒最敏感的方法之一是将待检血液或组织悬液大量接种于易感牛。如有猪、羊发病，也可接种于这些动物。潜伏期3～4天，最长达10天。(4)血清学诊断牛瘟病毒只有一个血清型，多种血清学试验都能用于诊断。琼脂扩散试验应用最多，但其敏感性较低，应用牛或兔的高免血清作为抗体。被检抗原是病牛或新鲜尸体组织碎块或淋巴结的浓缩抽提物。抗原滴入周围孔内，中央孔滴加高免血清。置室温下感作6～18小时，观察沉淀线。阳性病料出现单一清晰的沉淀线，且与阳性对照孔中标准抗原形成的沉淀线融合。病料如果采自发热4～6天扑杀的病牛，一般在12小时内出现1～2条沉淀线。病料采集过早或过迟，或者病料已经腐改，试验常归失败。病牛的淋巴结和脾脏以及感染细胞培养物内均含有补体结合抗原。抗原可以煮沸30分钟，应用丙酮或乙醚提取均能保持稳定。用淋巴结盐水悬液经离心沉淀制备的抽提液，也有补结抗原活性。高免血清的工作价需事先测定，在抗原－抗体混合液内加入5单位补体，置4℃冰箱过夜。由于牛瘟免疫血清能抑制麻疹病毒的血凝作用，如果免疫血清与可疑病料作用后丧失了抑制麻疹病毒的血凝作用，即证明这种病料来自牛瘟。用康复或高免血清作中和试验，容易鉴定牛瘟病毒。适宜的反应时间为37℃1小时或4℃18～24小时。通常在组织培养细胞上进行。检测病畜体内的特异性抗体，可应用中和试验或补体结合试验，但需采取双份血清。
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