耐热芽孢的测定

录入时间:2009-8-13 14:01:33 来源：食品伙伴网

1、仪器和试剂

（1）生化培养箱：36±1℃

（2）高压蒸汽灭菌锅

（3）恒温水浴锅：46±1℃

（4）天平

（5）电炉

（6）吸管：1ml和10ml，标有0.1ml单位的刻度

（7）三角烧瓶：容量为250ml、500ml

（8）平皿：皿底直径为9cm

（9）试管：15×150mm

（10）酒精灯

（11）试管架、试管框

（12）灭菌刀或剪刀、灭菌镊子

（13）酒精棉球

（14）记号笔

（15）白瓷缸（用于煮开水）

（16）温度计：0-100℃

（17）营养琼脂培养基：购买制好的营养琼脂，按说明分装于300ml三角瓶中，高压灭菌121℃、15分钟。

（18）生理盐水：8.5gNaCl溶于1000ml蒸馏水中，高压灭菌121℃、15分钟。

2、方法

（1）用10ml灭菌吸管吸取5ml奶样加入灭菌试管中。

（2）在另一支试管加入与奶样等量的水。

（3）在装水的试管中插一支温度计。

（4）将装有奶样和水的试管同时放入沸水浴中（在电炉上用白瓷缸把水煮沸，并保持沸腾）。

（5）直至“装水试管”的温度达到100℃，计时10分钟(如果水不到100℃就沸腾，则等候时间延长；或在水中加入盐以提供高沸点温度，但要避免奶样沸腾)。

（6）10分钟后，取出试管，用冷水冲，使含奶样的试管冷却。

（7）用1ml灭菌吸管分别吸1ml冷却后的奶样于两个灭菌平皿中。

（8）及时将冷却至46℃的营养琼脂注入平皿约15ml，并转动平皿使之混匀；同时将营养琼脂分别注入加有1ml灭菌生理盐水的平皿和另一个灭菌的空白平皿内，做空白对照。

（9）待营养琼脂凝固后，翻转平板。置于55±1℃的培养箱内培养48-72h，取出计数。

3、计数

同菌落总数测定的计数方法。