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3M环境李斯特菌测试片操作



录入时间:2009-8-25 16:22:51 来源:食品伙伴网

1.     将未开封的测试片贮藏在<= 8 oC (46 oF)的环境下,并在包装上标示的有效期内使用。在高湿度的地方,最好在使用前将测试片回复到室温。
2.       已开封的测试片,将开口反折,用胶带封好。
3.       为防止暴露于潮湿的环境中,请不要冷藏已开封的测试片。将胶带封好的测试片贮藏在低温干燥的地方,保持时间不超过1个月。请勿将测试片放在温度> 25 oC (77 oF)和(或)相对湿度> 50%的环境中。
4.       用涂抹棒、海棉或其它采样设备收集环境样本。湿润采样设备的液体应<= 10 mL。湿润剂可以是无菌水、缓冲蛋白胨水(Buffered Peptone Water, BPW),或中和缓冲液,如Letheen肉汤或Dey/Engley (DE)中和肉汤。
5.       在无菌环境下在收集的样品中添加5 mL,20-30oC,灭过菌的缓冲蛋白胨水(BPW)溶液。 不要将Petrifilm EL测试片与Vermont 培养基(UVM)、Fraser肉汤、李斯特菌增菌培养基 (LEB)或缓冲李斯特菌增菌培养基(BLEB)共用。
6.       混合,蠕动或旋转样品与BPW的混合液将近一分钟。将样品置于室温(20-30 oC) 1h,最久不超过1.5 h,以修复损伤的李斯特菌。
7.       将测试片置于平坦表面处,揭开上层膜。
8.       用3MTM电子移液枪或其它移液器垂直滴加3 mL样品到下层膜的中央。
9.       将上层膜缓慢盖下,以免产生气泡。
10.   轻轻地将塑料压板放在位于接种区上层膜上。不要压,扭转或滑动压板。提起压板。等至少10分钟,以使胶体凝固。
11.   将测试片透明面朝上,可叠放至10片,在35oC ± 1oC或37oC ± 1oC下培养28h ± 2 h。
12.   Petrifilm EL测试片能够用标准的菌落计数器或其它光学放大器计数或判读。不要计数圆形轮廓上的菌落,因为它们不受选择性培养基的作用。
13.   1对于定性检测,根据紫红色菌落的存在与否,将结果计为检出和未检出。
如果是/否的结果已经能够满足报告要求,那么你可以选择定性检测。
14.   对于半定量检测,根据出现紫红色菌落的相对量来记录结果。 如果你是根据菌落数的相对含量来采取相应的措施,并且没必要记录实际菌落数,那么你可以选择半定量检测。李斯特菌的含量应记录为对采样区域和企业标准有指导意义的形式(如低,中,高,或可接受和不可接受)
15.   对于定量检测,计数所有紫红色菌落。 如果你根据菌落数来采取相应的措施,你可以采用定量检测。测试片上李斯特菌数:16
请参考判读手册的“定量采样与判读”部分来计算每个环境样本中的李斯特菌数。
16.   可挑区菌落进行进一步鉴定。掀起上层膜,从胶上挑取菌落。

 

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