苏云金杆菌的部分生化试验鉴定

一、目的要求：
本实验是通过简单的生化测定来了解苏云金杆菌的生化鉴定技术。
鉴定苏云金杆菌的生化指标是：V、P反应，卵磷脂酶，蛋白水解，吐温酶，水杨素，七叶灵、蔗糖、甘露糖、表膜、酶、淀粉、几丁质酶、精氨酸脱羟酶等。

二、实验材料：
1、  天平 2、电炉 3、药勺4、量筒5、烧杯6、pH试纸7、高压锅（手提式）8、接种环
三、实验内容：
1、糖利用：
蛋白胨                                     1%
琼脂                                        2%
蔗糖（甘露糖）                         1%（水杨素为0.5%）
1%酸性复红水溶液                     0.5%
蛋白胨加热溶于水中，加入酸性复红水溶液。分别加入一种糖加热溶解，以不加糖的蛋白胨作对照。分装试管，调pH至7.58磅灭菌30分钟。
接种后于30℃恒温培养检查产酸情况，若培养基变红者为正反应。
2、七叶灵利用：
牛肉膏                                1%
七叶灵                                0.5%
琼脂                                  2%
另配5%三氯化铁水溶液单独灭菌。培养基溶后，先将三氯化铁每皿滴入2滴，后倒平板混匀。凝固后电接菌种，30 ℃培养3-5天。菌苔周围出现深褐色区为阳性反应。
3、V、P反应：
   蛋白胨5克  葡萄糖5克  NaCl 5克  蒸馏水 1000毫升
分装试管   8磅30分钟灭菌
接菌后于37 ℃培养24小时，每管加入4%KOH溶液10-20滴，再加等量的5%的一萘酚乙醇水溶液后，用力振荡。然后置37 ℃下保温0.5小时。培养物出现红色即为V、P正反应，并设未接种的试管为对照。

 4、淀粉水解试验：
牛肉膏 5克  NaCl 5克  可熔性淀粉 5克  琼脂  10克  蒸馏水 1000毫升 
将试验菌点种于平板上，徒长出菌落后，收Lugoc氏碘液倾注于平板表面，菌落四周有透明圈者为阳性放应。