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细菌培养技术(二)



录入时间:2010-3-11 10:42:56 来源:青岛海博

一、常用培养基的制备
  (一)普通肉汤培养基
    【材料】
 1. 新鲜牛肉或牛肉膏,蛋白胨,氯化钠,琼脂,蒸馏水。
 2. 酚红指标剂,比色架及标准比色管或精密pH试纸。
 3. 漏斗,量筒,三角烧瓶,试管等。
  【方法】
 1. 称取去脂去腱绞碎的鲜牛肉500克,浸于1000毫升蒸馏水中,冰箱过夜,次日煮沸30分钟,纱布过滤,蒸馏水补足其量,(也可用牛肉膏3克加蒸馏水1000毫升加热溶化),即为肉浸液。
 2. 取肉浸液1000毫,氯化钠5克,蛋白胨10克混合加热溶化。
 3. 调整PH为7.6,用滤纸过滤分装于中试管或三角烧瓶内,塞紧棉塞。
  【用途】
 供基础培养基用,营养比肉膏汤好,一般营养要求不高的菌均可生长。
  (二)普通琼脂培养基
  琼脂是石花菜等海藻类提取的胶体物质,其化学成份主要是多糖。当温度达到98℃以上可溶解于水,45℃以下则凝固。琼脂对细菌一般无营养作用(除自然界中极少数菌可利用琼脂之外),纯属赋形剂。便于人们制做斜面、平板、高层等不同类型的固体培养基。
  【材料与方法】
  普通肉汤培养基100毫升,加入琼脂2~3克,加热溶化,用蒸馏水补足失去水分,调整PH为7.6后分装中试管、平皿等器皿,高压蒸气15磅灭菌20分钟,可制成普通琼脂斜面和普通琼脂平板。
  【用途】
  供一般细菌培养用,并可作无糖基培养基。
(三)半固体培养基
  【材料与方法】
取普通肉汤培养基100毫升,加入琼脂0.5~0.7克,加热溶化。调整PH为7.6,分装于小试管内,每管1~5毫升,高压蒸气磅灭菌20分钟,待冷后放入4℃冰箱备用。
  【用途】
保存一般菌种用,并可观察细菌的动力及生化反应。
(四)血液琼脂培养基
  【材料与方法】
将高压灭菌后普通琼脂培养基。冷至45℃~50℃时以无菌手续操作加入5%~10%血液(人或动物脱纤维无菌血液)。可制成血平板和血斜面。 
  【用途】
供营养要求较高的细菌分离培养用,亦可观察细菌的溶血特征。
 

 

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