细菌培养技术（二）

一、常用培养基的制备
  （一）普通肉汤培养基
    【材料】
 1. 新鲜牛肉或牛肉膏，蛋白胨，氯化钠，琼脂，蒸馏水。
 2. 酚红指标剂，比色架及标准比色管或精密pH试纸。
 3. 漏斗，量筒，三角烧瓶，试管等。
  【方法】
 1. 称取去脂去腱绞碎的鲜牛肉500克，浸于1000毫升蒸馏水中，冰箱过夜，次日煮沸30分钟，纱布过滤，蒸馏水补足其量，（也可用牛肉膏3克加蒸馏水1000毫升加热溶化），即为肉浸液。
 2. 取肉浸液1000毫，氯化钠5克，蛋白胨10克混合加热溶化。
 3. 调整PH为7.6，用滤纸过滤分装于中试管或三角烧瓶内，塞紧棉塞。
  【用途】
 供基础培养基用，营养比肉膏汤好，一般营养要求不高的菌均可生长。
  （二）普通琼脂培养基
  琼脂是石花菜等海藻类提取的胶体物质，其化学成份主要是多糖。当温度达到98℃以上可溶解于水，45℃以下则凝固。琼脂对细菌一般无营养作用（除自然界中极少数菌可利用琼脂之外），纯属赋形剂。便于人们制做斜面、平板、高层等不同类型的固体培养基。
  【材料与方法】
  普通肉汤培养基100毫升，加入琼脂2~3克，加热溶化，用蒸馏水补足失去水分，调整PH为7.6后分装中试管、平皿等器皿，高压蒸气15磅灭菌20分钟，可制成普通琼脂斜面和普通琼脂平板。
  【用途】
  供一般细菌培养用，并可作无糖基培养基。
（三）半固体培养基
  【材料与方法】
取普通肉汤培养基100毫升，加入琼脂0.5~0.7克，加热溶化。调整PH为7.6，分装于小试管内，每管1~5毫升，高压蒸气磅灭菌20分钟，待冷后放入4℃冰箱备用。
  【用途】
保存一般菌种用，并可观察细菌的动力及生化反应。
（四）血液琼脂培养基
  【材料与方法】
将高压灭菌后普通琼脂培养基。冷至45℃~50℃时以无菌手续操作加入5%~10%血液（人或动物脱纤维无菌血液）。可制成血平板和血斜面。 
  【用途】
供营养要求较高的细菌分离培养用，亦可观察细菌的溶血特征。