草净津检测方法

1．分析目标化合物

    草净津

2．仪器设备

    带碱热离子检测器或高灵敏度氮磷检测器的气相色谱仪和气相色谱--质谱仪。

3．试剂

丙酮，氯化钠， 乙酸乙酯，正己烷，乙腈
4．标准品

    草净津:含草净津97％以上, 熔点为168℃～169℃。

5．试验溶液的制备
 
a 提取方法
①谷类和豆类
    将样品粉碎，通过420μm的标准网筛后，称取其10.0g，加入20mL水,放置2小时。
    加入100mL丙酮，搅拌3分钟后，用涂布1cm厚硅藻土的滤纸抽滤于磨口减压浓缩器中。取出滤纸上的残留物，加入50mL丙酮，搅拌3分钟后，按上述同样操作，合并滤液于磨口减压浓缩器中，40℃以下浓缩至约30mL。
    将其移入预先注入100mL 10%氯化钠溶液的300mL分液漏斗中。用100mL乙酸乙酯：正己烷(1：4)混合溶液洗涤上述减压浓缩器的茄型瓶，合并洗涤液于上述分液漏斗中。用振荡器激烈振荡5分钟后，静置，乙酸乙酯和正己烷层移入300mL三角瓶中。水层中加入50mL乙酸乙酯：正己烷(1：4)混合溶液，按上述同样操作，合并乙酸乙酯和正己烷层于上述三角瓶中。加入适量无水硫酸钠，不时振荡、混合，放置15分钟后，滤入磨口减压浓缩器中。再用20mL乙酸乙酯：正己烷(1：4)混合溶液洗涤三角瓶，以此洗涤液洗涤滤纸上的残留物，重复操作二次。合并二洗涤液于减压浓缩器中，40℃以下除去乙酸乙酯和正己烷。
    残留物中加入30mL正己烷，移入100mL分液漏斗。加入30mL正己烷饱和乙腈, 用振荡器激烈振荡5分钟后，静置，乙腈层移入磨口减压浓缩器中。正己烷层中加入30mL正己烷饱和乙腈，按上述同样操作重复二次，合并乙腈层于减压浓缩器中，40℃以下除去乙腈。残留物中加入5mL正己烷溶解。
② 蔬菜
    准确称取约1kg样品，必要时定量加入适量的水，搅拌混合均匀后，称取相当于20.0g样品的量。
    加入100mL丙酮，搅拌3分钟后，用涂布1cm厚硅藻土的滤纸抽滤于磨口减压浓缩器中。取出滤纸上的残留物，加入50mL丙酮，搅拌3分钟后，按上述同样操作，合并滤液于减压浓缩器中，40℃以下浓缩至约30mL。
    将其移入预先注入100mL 10%氯化钠溶液的300mL分液漏斗中。用100mL乙酸乙酯：正己烷(1：4)混合溶液洗涤上述减压浓缩器的茄型瓶，合并洗涤液于上述分液漏斗中。 用振荡器激烈振荡5分钟后，静置，乙酸乙酯和正己烷层移入300mL三角瓶中。水层中加入50mL乙酸乙酯：正己烷(1：4)混合溶液，按上述同样操作，合并乙酸乙酯和正己烷层于上述三角瓶中。加入适量无水硫酸钠，不时振荡、混合，放置15分钟后，滤入磨口减压浓缩器中。再用20mL乙酸乙酯：正己烷(1：4)混合溶液洗涤三角瓶，以此洗涤液洗涤滤纸上的残留物，重复操作二次。合并两洗涤液于减压浓缩器中，40℃以下除去乙酸乙酯和正己烷。残留物中加入5mL正己烷溶解。
b 净化方法
    在内径15mm，长300mm色谱管中注入5g悬浮在正己烷中的柱色谱用合成硅酸镁，其上面再装入约5g无水硫酸钠,放出正己烷至柱上端留有少量正己烷。柱中注入a 提取方法所得的溶液后，注入100mL丙酮：正己烷（1∶19）混合溶液,弃去流出液。再注入100mL丙酮：正己烷（3∶7）混合溶液，收集流出液于磨口减压浓缩器中，40℃以下除去丙酮和正己烷，残留物中加入丙酮溶解，准确至4mL，此为试验溶液 。

6．操作方法

a  定性试验
    按下列操作条件进行试验，试验结果必须与标准品的一致。
    操作条件
    柱：内径0.25mm、长30m的石英毛细管，涂布0.25μm厚气相色谱用50%苯基--甲基硅酮，老化。
    柱温：在50℃保持2分钟，此后每分钟升温15℃。达到220℃后保持2分钟。再每分钟升温4℃，达到240℃后保持2分钟。然后每分钟升温20℃，达到280℃后保持10分钟。
    进样器温度：180℃ 
    检测器温度：280℃ 
    气体流量：以氦气为载气。调整流速使草净津约20分钟流出，调节空气和氢气的流量至适当条件。
b 定量试验
    根据与a 定性试验相同操作条件所得的试验结果，峰高法或峰面积法定量。
c 确证试验
    根据与a 定性试验相同的操作条件，用气相色谱--质谱仪测定。试验结果必须与标准品的一致。此外，必要时用峰高法和峰面积法进行定量。

7．定量限   
 
    0.01 mg/kg

8．注意事项

    因为进样器温度高会分解草净津，引起峰分裂，所以进样口温度为180℃。