二氯喹啉酸检测方法

1．分析目标化合物

    二氯喹啉酸

2．仪器设备

    带紫外分光光度检测器的高效液相色谱仪。

3．试剂
 丙酮

10％氯化钠溶液
 正己烷

乙酸乙酯
乙腈
4．标准品

    二氯喹啉酸：含二氯喹啉酸99％以上，熔点为274℃。

5．试验溶液的制备

a 提取方法
    将样品粉碎，通过420μm的标准筛后，称取其10.0g，加入20mL水，放置2小时。
    加入100mL丙酮，搅拌3分钟后，用涂布1cm厚硅藻土的滤纸抽滤于磨口减压浓缩器中。取出滤纸上的残留物，加入50mL丙酮，搅拌3分钟后，按上述同样操作，合并滤液于减压浓缩器中，40℃以下浓缩至约30mL。
    将其移入预先注入50mL 10％氯化钠溶液的300mL分液漏斗中。用50mL正己烷洗涤上述减压浓缩器的茄型瓶，合并洗液于上述分液漏斗中。用振荡器激烈振荡5分钟后，静置，舍弃正己烷层。水层中加入50mL正己烷，按上述同样操作。
    水层中加入0.5g碳酸钾后，移入预先加入50mL乙酸乙酯的300mL分液漏斗中。用振荡器激烈振荡5分钟后，静置，舍弃乙酸乙酯层。在水层中加入50mL乙酸乙酯，按上述同样操作。在水层中加入2mL 6mol／L盐酸，轻摇混匀。加入50mL乙酸乙酯，用振荡器激烈振荡5分钟后，静置，乙酸乙酯层移入200mL三角瓶中。水层中加入50mL乙酸乙酯，按上述同样操作，合并乙酸乙酯层于上述三角瓶中。加入适量无水硫酸钠，不时振荡、混合，放置15分钟后，滤入磨口减压浓缩器中，再用20ml乙酸乙酯洗涤三角瓶，以此洗涤液洗涤滤纸上的残留物，重复操作二次，合并两洗涤液于减压浓缩器中，在40℃以下除去乙酸乙酯。
b 净化
    在a 提取方法所得的残留物中加入乙腈溶解，准确至5mL后，用微孔过滤膜（ 0.45μm ）过滤，此为试验溶液。

6．操作方法

a 定性试验
    按下列操作条件进行试验，试验结果必须与标准品的一致。
    操作条件
    柱填充剂：十八烷基甲硅烷基化硅胶(粒径5μm)。
    柱：内径4.6mm，长250mm不锈钢管。
    柱温： 40℃
    检测器：波长235nm。
    流动相：乙腈：水(35：65)混合溶液。调整流速使二氯喹啉酸7～10分钟流出。
b 定量试验
    根据与a 定性试验相同操作条件所得的试验结果，峰高法和峰面积法定量。

7．定量限

    0.01 mg/kg