农药残留——达灭净检测方法

1．分析目标化合物

    达灭净

2．仪器设备

    带紫外分光光度检测器的高效液相色谱仪。

3．试剂

     丙酮

氯化钠溶液
乙酸乙酯

正己烷

乙腈

无水硫酸钠
4．标准品

    达灭净： 含达灭净99％以上，熔点为250℃～253℃。

5．试验溶液的制备

a 提取方法
    将样品粉碎，通过420μm的标准网筛，称取其10.0g，加入水20mL，放置2小时。
    加入100mL丙酮，搅拌3分钟后，用涂布1cm厚硅藻土的滤纸，抽滤于磨口减压浓缩器中。取出滤纸上的残留物，加入50mL丙酮，搅拌3分钟后，按上述同样操作，合并滤液于减压浓缩器中，40℃以下浓缩至约30mL。
    将其移入预先注入100mL 10％氯化钠溶液的300mL分液漏斗中。用100mL乙酸乙酯：正己烷(1：4)混合溶液洗涤上述减压浓缩器的茄型瓶，合并洗液于上述分液漏斗中。用振荡器激烈振荡5分钟后，静置，乙酸乙酯和正己烷层移入300mL三角瓶中。水层中加入50mL乙酸乙酯：正己烷(1：4)混合溶液，按上述同样操作，合并乙酸乙酯和正己烷层于上述300mL三角瓶中。加入适量无水硫酸钠，不时振荡、混合，放置15分钟后，滤入磨口减压浓缩器中。再用20mL正己烷洗涤上述三角瓶，以此洗涤液洗涤滤纸上的残留物，重复操作二次，合并两洗涤液于上述减压浓缩器中，40℃以下除去乙酸乙酯和正己烷。
    残留物中加入30 mL正己烷，移入100mL分液漏斗中。加入30mL正己烷饱和乙腈，用振荡器激烈振荡5分钟后，静置，乙腈层移入磨口减压浓缩器中。正己烷层中加入30 mL正己烷饱和乙腈，按上述同样操作，重复操作两次，合并乙腈层于减压浓缩器中，40℃以下除去乙腈。残留物中加入5mL正己烷溶解。
b 净化方法    
    在内径15mm、长300mm色谱柱中装入5g悬浮在正已烷中的柱色谱用硅胶（粒径63～200μm），其上面再加入约5g无水硫酸钠，放出正已烷至柱上端留有少量正已烷。注入a 提取方法所得的溶液后，注入100mL丙酮：正已烷（1：9）混合溶液，弃去流出液，再注入100mL丙酮：正已烷（3：7）混合溶液，收集流出液于磨口减压浓缩器中，40℃以下除去丙酮和正己烷。残留物中加入乙腈溶解，准确至4mL，此为试验溶液。

6．操作方法

a 定性试验
    按下列的操作条件进行试验，试验结果必须与标准品的一致。
    操作条件
    柱填充剂：十八烷基甲硅烷基化硅胶(粒径5μm)
    柱：内径4.6mm、长150mm 不锈钢管。
    柱温： 40℃
    检测器：波长245nm
    流动相：水：乙腈(1：1)混合溶液，调整流速使达灭净约6分钟流出。
b 定量试验
    根据与a 定性试验相同试验条件所得的试验结果，峰高法或峰面积法定量。

7．定量限

    0.02 mg/kg