农药残留——敌敌畏和敌百虫检测方法

1．分析目标化合物

    敌敌畏  、敌百虫                                                                         

2．仪器设备

    带碱热离子检测器、火焰光度检测器（磷干涉片，波长526nm）或高灵敏度氮磷检测器气相色谱仪和气相色谱—质谱仪

3．试剂

  丙酮

  乙酸乙酯

  10％氯化钠溶液
  无水硫酸钠

  正己烷

  乙腈

4．标准品

    敌敌畏：含敌敌畏97％以上，沸点为128℃～129℃(减压：2.5kPa)。
    敌百虫：含敌百虫99％以上，熔点为83℃～84℃。

5．试验溶液的制备

a 提取方法
    ①谷类、豆类、种籽类
    将样品粉碎，通过420μm的标准网筛后，称取其10.0g，加水20mL，放置2小时。
    加入100mL丙酮，搅拌3分钟后，用涂布1cm厚硅藻土的滤纸，抽滤于磨口减压浓缩器中。取出滤纸上的残留物，加入50mL丙酮，搅拌3分钟后，按上述同样操作，合并滤液于减压浓缩器中，40℃以下浓缩至约30mL。
    将其移入预先注入100mL 10％氯化钠溶液的300 mL分液漏斗中。用100mL乙酸乙酯洗涤上述减压浓缩器的茄型瓶，并入洗液于上述分液漏斗中。用振荡器激烈振荡5分钟后，静置，乙酸乙酯层移入300mL三角瓶中。水层中加入50mL乙酸乙酯，按上述同样操作。合并乙酸乙酯层于上述300mL三角瓶中。加入适量无水硫酸钠，不时振荡、混合，放置15分钟后，滤入磨口减压浓缩器中。再用20mL乙酸乙酯洗涤上述三角瓶，以此洗涤液洗涤滤纸上的残留物，重复操作二次。合并两洗涤液于上述减压浓缩器中，40℃以下除去乙酸乙酯。
    残留液中加入30mL正己烷，移入100mL分液漏斗中。加入30mL正己烷饱和乙腈，用振荡器激烈振荡5分钟后，静置，乙腈层移入磨口减压浓缩器中。正己烷层中再加入30 mL正己烷饱和乙腈，按上述同样操作，重复操作两次。合并乙腈层于减压浓缩器中，40℃以下浓缩至约1mL，在室温下用氮气进一步吹干。残留物中加入5mL丙酮：正己烷(1：1)混合溶液溶解。
    ②水果、蔬菜、末茶和啤酒花
    水果和蔬菜：准确称取约1kg样品，必要时定量加入适量水，搅碎混合均匀后，称取相当于20.0g的量。
    啤酒花：样品粉碎后，称取其5.00g，加入水20mL，放置2小时。
    末茶：称取5.00g样品，加入水20mL，放置2小时。
    加入100mL丙酮，搅拌3分钟后，用涂不1cm厚硅藻土的滤纸，抽滤于磨口减压浓缩器中。取出滤纸上的残留物，加入50mL丙酮，搅拌3分钟后，按上述同样操作，合并滤液于减压浓缩器中，40℃以下浓缩至约30mL。
    将其移入预先注入100mL 10％氯化钠溶液的300mL分液漏斗中。用100mL乙酸乙酯洗涤上述减压浓缩器的茄型瓶，合并洗液于上述分液漏斗中，用振荡器激烈振荡5分钟后，静置，乙酸乙酯层移入300mL三角瓶中。水层中加入50mL乙酸乙酯，按上述同样操作。合并乙酸乙酯层于上述300mL三角瓶中。加入适量无水硫酸钠，不时振荡、混合，放置15分钟后，滤入磨口减压浓缩器中。再用20mL乙酸乙酯洗涤上述三角瓶，以此洗涤液洗涤滤纸上的残留物，重复操作二次。合并二洗涤液于上述减压浓缩器中，40℃以浓缩至约1mL，在室温下用氮气进一步吹干。残留物中加入5mL丙酮：正己烷(1：1)混合溶液溶解。
    ③ 末茶以外的茶
    将9.00 g样品浸泡于540mL 100℃水中，在室温下放置5分钟后,过滤，移取360mL冷却后的滤液于500mL三角瓶中。加入2mL饱和乙酸铅溶液，室温下放置1小时后，用涂布1cm厚硅藻土的滤纸抽滤于1000mL分液漏斗中，再用50mL丙酮洗涤滤纸上的残留物，并入洗液于上述分液漏斗中，加入100g氯化钠及100mL乙醚，用振荡器激烈振荡5分钟后，静置，乙醚层移入300mL三角瓶中。水层中加入100mL乙醚，按上述同样操作，合并乙醚层于上述三角瓶中。加入适量无水硫酸钠，不时振荡、混合，放置15分钟后，滤入磨口减压浓缩器中，再用20mL乙醚洗涤上述三角瓶，以此洗涤液洗涤滤纸上的残留物，重复操作二次，合并两洗涤液于上述减压浓缩器中，40℃以下浓缩至约1mL，在室温下用氮气进一步吹干。残留物中加入5mL丙酮：正己烷(1：1)混合溶液溶解。

b 净化方法
    ①菠菜和茶以外的农作物
    在内径15mm、长300mm色谱柱中装入5g悬浮在正已烷中的柱色谱用硅胶(粒径63～200μm)，其上面再加入约5g无水硫酸钠，放出正己烷：丙酮（1：1）混合溶液至柱上端留有少量的正己烷：丙酮（1：1）混合溶液。柱中注入a 提取方法所的的溶液后，注入150mL丙酮：正己烷(1：1)混合溶液，收集流出液于磨口减压浓缩器中，40℃以下浓缩至约1mL，在室温下用氮气进一步吹干。残留物中加入丙酮溶解，准确至2mL（水果、蔬菜为4mL）。
    ② 菠菜和茶
    在内径15mm、长300mm色谱柱中装入5g悬浮在正已烷中的柱色谱用硅胶(粒径63～200μm)，其上面再加入约5g无水硫酸钠，放出正己烷：丙酮（1：1）混合溶液至柱上端留有少量的正己烷：丙酮（1：1）混合溶液。柱中注入a 提取方法所的的溶液后，注入150mL丙酮：正己烷(1：1)混合溶液，收集流出液于磨口减压浓缩器中，40℃以下浓缩至约1mL，在室温下用氮气进一步吹干。残留物中加入丙酮溶解，准确至4mL（末茶为8mL）。在活性炭小柱(500mg) 中注入10mL丙酮，流出液舍去。柱中注入1mL上述溶液后，注入10mL丙酮，收集流出液于磨口减压浓缩器中，40℃以下浓缩至约1mL。

c 衍生化
    移取1mL b 净化方法所得的溶液（波菜和茶时取全量），放入10mL的具螺旋塞试管中，在室温下用氮气除去丙酮。注入100μL N－甲基双三氟乙酰胺和900μL丙酮：吡啶(1000：1)混合溶液。塞紧后在不时振荡混合下60℃加热2小时，放置至室温。此为试验试样。

6．操作方法

a 定性试验
    按下列的操作条件进行试验，试验结果应与用标准品按5．试验溶液的制备中c 衍生化相同操作所获得的结果一致。
    操作条件
    柱：内径0.53mm，长10～30m 石英毛细管，涂布1.0μm厚气相色谱法用14％氰丙基苯基－甲基硅酮，老化。
    柱温：50℃保持1分钟，此后以每分钟升温20℃。到240℃后，保持10分钟。
    进样器温度：240℃
    检测器温度：245℃
    气体流量：以氦气作载气。调节流速使敌敌畏约3分钟流出。同时调节空气和氢气流量至适当条件。
b 定量试验
    根据与a 定性试验相同操作条件获得的试验结果，峰高法或峰面积法定量。
c 确证试验
    按照与a 定性试验相同的操作条件，用气相色谱—质谱仪测定，试验结果必须与用标准品按5．试验溶液的制备c 衍生化相同操作所获得的结果一致。必要时，用峰高法或峰面积法进行定量。

7．定量限

    敌敌畏    0.01 mg/kg
    敌百虫    0.01 mg/kg

8．注意事項

    敌敌畏不因衍生化操作而变化。敌百虫衍生物易分解而污染气相色谱仪的进样器和柱子。敌百虫的衍生物加热时间如超过3小时，回收率差。使用碱热离子检测器、高灵敏氮磷检测器作为检测器时，柱子最好为经老化的5 %苯基--甲基硅酮柱。