农药残留——二甲嘧菌胺检测方法

1．分析目标化合物  
  
    二甲嘧菌胺

2．仪器设备

    带碱热离子检测器或高灵敏度氮磷检测器的气相色谱仪和气相色谱—质谱仪。

3．试剂

    丙酮

    氯化钠溶液

    正己烷

    乙腈

    无水硫酸钠
    柱色谱用硅胶：将柱色谱用硅胶(粒径63～200μm)在130℃加热12小时以上，干燥器中放冷，加5％的水。

4．标准品

    二甲嘧菌胺： 含二甲嘧菌胺99％以上，熔点为96℃～97℃。

5．试验溶液的制备

a 提取方法
①豆类：
    将样品粉碎，过420μm的标准网筛后，称取其10.0g，加入20mL水，放置2小时。
    加入100mL丙酮，搅拌3分钟后，用涂布1cm厚硅藻土的滤纸抽滤于磨口减压浓缩器中。取出滤纸上的残留物，加入50mL丙酮，搅拌3分钟后，按上述同样操作，合并滤液于减压浓缩器中，40℃以下浓缩至约30mL。
    将其移入预先注入100mL 10％氯化钠溶液的300 mL分液漏斗中。用100mL正己烷洗涤上述减压浓缩器的茄型瓶，合并洗液于上述分液漏斗中。用振荡器激烈振荡5分钟后，静置，正己烷层移入300mL三角瓶中。水层中加入50mL正己烷，按上述同样操作。合并正己烷层于上述300mL三角瓶中。加入适量无水硫酸钠，不时振荡、混合，放置15分钟后，滤入磨口减压浓缩器中。再用20mL正己烷洗涤三角瓶，以此洗涤液洗涤滤纸上的残留物，重复操作二次。合并两洗涤液于减压浓缩器中，在40℃以下除去正己烷。
    残留物中加入30mL正己烷，移入100mL分液漏斗中。加入30mL正己烷饱和乙腈，用振荡器激烈振荡5分钟后，静置，乙腈层移入磨口减压浓缩器中。正己烷层中加入30mL正己烷饱和乙腈，按上述同样操作，重复操作两次。合并乙腈层于减压浓缩器中，40℃以下除去乙腈。残留物中加入5mL正己烷溶解。
①    水果和蔬菜：
    准确称取约1kg样品，必要时定量加入适量水，搅碎混合均匀后，称取相当于20.0g样品的量。
    加入100mL丙酮，搅拌3分钟后，用涂布1cm厚硅藻土的滤纸抽滤于磨口减压浓缩器中。取出滤纸上的残留物，加入50mL丙酮，搅拌3分钟后，按上述同样操作，合并滤液于减压浓缩器中，40℃以下浓缩至约30mL。   
    将其移入预先注入100mL 10％氯化钠溶液的300 mL分液漏斗中。用100mL正己烷洗涤上述减压浓缩器的茄型瓶，合并洗液于上述分液漏斗中。用振荡器激烈振荡5分钟后，静置，正己烷层移入300mL三角瓶中。水层中加入50mL正己烷，按上述同样操作。合并正己烷层于上述300mL三角瓶中。加入适量无水硫酸钠，不时振荡、混合，放置15分钟后，滤入磨口减压浓缩器中。再用20mL正己烷洗涤三角瓶，以此洗涤液洗涤滤纸上的残留物，重复操作二次。合并二洗涤液于减压浓缩器中，40℃以下除去正己烷。残留物中加入5mL正己烷溶解。
b 净化方法
    在内径15mm、长300mm色谱管中注入5g悬浮在正已烷中的柱色谱用硅胶(粒径63～200μm)，其上面在装入约5g无水硫酸钠，放出正己烷至柱上端留有少量的正己烷。柱中注入a 提取方法所得的溶液后，注入100mL丙酮：正己烷(1：99)混合溶液，舍弃流出液。再注入50mL丙酮：正己烷(1：19)混合溶液，收集流出液于磨口减压浓缩器中，40℃以下除去丙酮和正己烷。残留物中加入正己烷溶解，准确至5mL，此为试验溶液。

6．操作方法

a 定性试验
    按下列操作条件进行试验，试验结果必须与标准品的一致。
    操作条件
    柱：内径0.25mm、长30m石英毛细管，涂布0.25μm厚气相色谱用5%的苯基－甲基硅酮，老化。
    柱温：80℃保持2分钟，此后每分钟升温30℃。到180℃后保持1分钟。再每分钟升温5℃，到达250℃后，再每分钟升温10℃，到达280℃后保持5分钟。
    进样器温度：250℃
    检测器温度：280℃
    气体流量：以氦气作载气，调节流速使二甲嘧菌胺约11分钟流出。调节空气和氢气的流量至适当条件。
b 定量试验
    根据与a 定性试验相同操作条件所得的试验结果，峰高法或峰面积法定量。
c 确证试验
    按照与a 定性试验相同的试验条件，用气相色谱—质谱仪测定。试验结果与标准品的一致。此外，必要时用峰高法或峰面积法进行定量。

7．定量限

    0.01 mg/kg