微生物培养基质控与图解——细菌的代谢与培养基

第三节       细菌的代谢与培养基

新陈代谢( metabolism)足生物有机体基本的特征之一，是生命活动中一切生化反应的总称。它包括物质的分解和物质的合成过程。细菌吸收了外界的营养，在酶的作用下将其分解，再在酶的作用下台成细菌菌体的成分。分解与合成两个过程伴同发生，紧密相关，维持了细菌细胞的生命，进行细菌的生长。通过检测细菌系统及代谢产物的生理，来鉴定细菌的

试验称生化试验。

生化试验可分为糖代谢试验、蛋白质代谢试验、盐利用试验和呼吸酶类斌验4种。

l.代谢试验

①氧化发酵试验O-F；②糖（醇）类发酵试验；③VP和甲基红试验

2.蛋白质代谢试验

①蛋白水解试验；②硫化氢试验；③吲哚试验；④脱羧酶试验；③脱氨试验；⑥尿素酶试验。

3.盐类代谢试验

①枸橼酸盐试验；②丙二酸盐利用试验；③硝酸盐还原试验

4．呼吸酶类试验

①氧化酶试验；②细胞色素氧化酶试验

表   IMVIC试验对肠杆菌属的鉴别作用

 

表  硫化氢和尿素酶试验对肠杆菌属的鉴别

 

 

 

 

在培养基中加入指示剂或某种化学物质抑制不需要的细菌生长，利于需要的细菌分离，这种培养基称为选择性培养基。常用的抑菌剂有胆盐、煌绿、玫瑰红钠、亚硒酸钠等。常用的指示荆有溴甲酚紫、溴麝香草酚蓝等。美蓝是氧化还原指示剂。

    例如，在培养基内加入青霉素可抑制革兰阳性细菌，而利于革兰阴性细菌的生长；如果加入链霉素，则可获得与加青霉素相反的选择效果；加入制霉素可抑制真菌，有利于细菌的分离。又如亚硫酸铋琼脂，既能抑制革兰阳性细菌生长，又能抑制许多革兰阴性细菌生长，但伤寒沙门菌却能在这个培养基上生长出具有棕色环的菌落。SS琼脂是临床细菌检验中一种常用的选择性培养基。大肠埃希菌在SS培养基上，因发酵乳糖而产酸，使指示剂中性红变深，并使胆盐沉淀，所以菌落红色而不透明。沙门菌分解含硫氨基酸而产生硫化氢，硫化氢与枸橼酸铁形成硫化铁，所以菌落中心呈黑色。痢疾志贺菌，既不发酵乳糖也不产生硫化氧，所以菌落无色透明，中等大小。粪链球菌可被枸橼酸钠抑制。枸橼酸铁有中和中性红的毒性的作用。硫代硫酸钠可缓解胆盐对志贺菌的毒害，中和煌绿和中性红的毒性，还可使大肠埃希菌落颜色鲜艳。常用的选择性培养基还有麦康凯( MacC)琼脂、伊红美兰(EMB)

琼脂、胆硫乳( DHL)琼脂及碱性琼脂等。