革兰阴性杆菌分离培养基——非发酵细菌用培养基

［用途］

金氏培养基（Kings Medium）用于检测假单胞菌产生的青脓素

[配法]

蛋白胨20g ，无水氯化镁1.4g ，无水硫酸钾10g，琼脂15g，甘油10ml，蒸馏水1L。

将上述成分加热、溶解，调pH 至7.2 ，分装试管，118-121 ℃ 灭菌15min ，制成斜面和高层备用。

[用法］

取待检菌划种于上述斜面上，35 ℃ 培养过夜。观察斜面上产色素清况。

2 氧化发酵试验培养基

[用途］

用于检测细菌代谢类型

[配法]

( 1 ) Hugh-Leifson培养基（革兰阴性杆菌用）：蛋白胨2g ，葡萄糖10g ，磷酸氢二钾0.3g，氯化钠5g，溴麝香草酚蓝（BTB）0.03g ，琼脂2.5g，蒸馏水1L。

( 2 ）葡萄球菌O／F （葡萄球菌和微球菌鉴别用）：胰蛋白陈10g ，酵母浸膏10g ，琼脂20g ，溴甲酚紫0.001g，蒸馏水1L ，葡萄糖10g。

将上述成分混合加热溶解，调pH 至7.1 ，分装于试管中，每支试管5ml，高压灭菌121 ℃ 15min，使成琼脂高层，备用。

[用法]

从斜面上挑取少许培养物，同时穿刺接种两支培养基，其中一支接种后，滴加液体石蜡于培养基表面，高度约1cm。置35 ℃ 孵箱培养24-48h 。培养基变黄表示细菌分解葡萄糖而产酸，颜色不变为不分解葡萄糖。

[质量控制]

金黄色葡萄球菌ATCC 25923 、大肠埃希菌ATCC 25922 发酵型；铜绿假单胞菌ATCC 27853氧化型；易变微球菌、粪产碱杆菌不利用
注：

( 1 )有些细菌不能在上述培养基上生长，需在该培养基中加入2 ％血清或10g /L酵母浸膏，重做试验。

( 2 )指示剂不能用乙醇配制，因有些细菌可使乙醇产酸，导致发酵或氧化反应影响结果判断。

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